妮妮呸呸
由于实验时间比较紧张,(因为当时做冻管的时候也是挑单菌落制备的冻管)想可不可以直接从冻管里挑一点菌如液体培养基作为种子液,然后再接入发酵液,制备感受态呢?不挑单菌落会很大程度上影响感受态转化效率吗?
请大家指教
huarenqiang5
感受态制备时不是一定要挑单菌落,可以在活化好的平板上划一条线挑菌去小摇。操作时只要保证无菌就可以。另外,补充二楼的转化后挑菌:一定要挑单菌落,而且要利索,不能沾到周围培养基上的空白地方,因为如果不小心碰到,上面有很多连接产物及片段会随着进一步划线在新的培养基上积累,如果用pcr去筛选阳性,会有很多假阳性的。
Dr_劉医生
感受态制备时不一定要挑单菌落,可以在活化好的平板上划一条线挑菌去小摇,操作时只要保证无菌就可以。
土井挞克树
可以做,但后续转染可能效果不佳,单菌的转化比较容易
dxyc42u
多个克隆也无所谓,单克隆的话,菌的性状稍微稳定些
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