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制备感受态一定要从挑单菌开始吗?

相关实验:质粒的制备

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妮妮呸呸

由于实验时间比较紧张,(因为当时做冻管的时候也是挑单菌落制备的冻管)想可不可以直接从冻管里挑一点菌如液体培养基作为种子液,然后再接入发酵液,制备感受态呢?不挑单菌落会很大程度上影响感受态转化效率吗?

请大家指教

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4 个回答

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huarenqiang5

有帮助

感受态制备时不是一定要挑单菌落,可以在活化好的平板上划一条线挑菌去小摇。操作时只要保证无菌就可以。另外,补充二楼的转化后挑菌:一定要挑单菌落,而且要利索,不能沾到周围培养基上的空白地方,因为如果不小心碰到,上面有很多连接产物及片段会随着进一步划线在新的培养基上积累,如果用pcr去筛选阳性,会有很多假阳性的。

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Dr_劉医生

有帮助

感受态制备时不一定要挑单菌落,可以在活化好的平板上划一条线挑菌去小摇,操作时只要保证无菌就可以。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可以做,但后续转染可能效果不佳,单菌的转化比较容易

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dxyc42u

有帮助

多个克隆也无所谓,单克隆的话,菌的性状稍微稳定些

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