ROS检测

请问有做过过氧化氢诱导HUVECs损伤检测ROS的吗？我最近用荧光显微镜拍照，发现先损伤后染色control组很亮，损伤组（200uM、400uM、600uM、800uM、1mM）反而没什么荧光，像染不上似的。先染色再损伤对照组不亮了，但其他损伤组荧光也不强，很微弱。请问大家有知道原因的吗？试了两次都是这样。

下面图片是先染色后损伤的

下面图片是先损伤后染色的

下面是应该出现的理想情况

请大神指点一下，孩子要哭了