紧急求助

基因和自杀质粒连接不上，一般是因为限制酶的识别位点大多是反向对称的,如果只用用同种酶切,所得片段的2端序列相同,在连接时,是随机连接,不仅会出现反向连接,而且会出现片段串联。

问一下你们实验室有没有人跟你用同一个连接酶，他们用的效果怎么样，连接酶会对连接效率造成很大影响；其次在凝胶回收那一步要做好，如果回收的不好的话也会使连接效率变低。