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双切酶体系中,两个酶的温度不一样,30和37该如何选择呢?

相关实验:酶切实验

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wewe白

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6 个回答

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WineQ慕雪

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先选择酶切低温要求的,再去酶切高温要求的

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balalaLy

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那就分开切,就是多做一步,繁琐一点。

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bamboopiggy

有帮助

可以先用其中一个酶切了,然后直接过柱回收,再用另外一个酶切就可以了。

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未来9

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30-37度都可以,没问题。一般有星活性的酶都不担心切不开,而是担心切多了

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lzy必有我师

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1、BamHI和XhoI都是常用酶,比较便宜,可以换一家公司买。至少Fermentas和NEB的BamHI都是37度的。

2. 分布酶切。单酶切,跑胶回收,再另一个单酶切。这要求你的DNA template多一点,比如质粒或者PCR产物。

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心细北方

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两种酶温度相差不多应该都可以的,实在不行首先用低温的酶先切,切完后抽提,抽提完后用高温的酶再切.

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