alirgnahs
Eason老歌迷
可以适当的加入dmso,来增加特异性。也可以适当提高退火的温度
dxywode
对PCR反应缓冲液的组成进行了最优化重组,使之较以往的KOD DNA多聚酶相比伸长性及扩增效果均有所提高,可对更多种类的目标物进行PCR反应。
未来9
必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸)。
bamboopiggy
提高你的annealing temperature,减少非特异性结合,至于延伸时间,因为一般酶是30s,1kb,你这个用7-10s延伸都可以,或者直接换用两步法也可以。