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想问一下,细菌DNA pcr跑胶之后 在正常的条带上方 都有一整行整齐的暗暗的条带(不是拖尾)应该考虑哪些可能造成这个结果的因素

相关实验:DNA 的琼脂糖凝胶电泳实验

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dxy_2ivd181t

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6 个回答

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迟C迟

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如果每次都有,不管是否换了样品,可能是成像系统出现了故障。

如果是远离点样空端出现暗条带,可能是引物二聚。

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dxy_u3sb70e2

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可能存在非特异性PCR产物哦。。。。

就比如你用GENOMIC DNA然后用两个特短的PRIMER做PCR的话,你肯定能得到一大片产物。于是在胶上会形成条带,SMEAR。

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cxsm

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基因组DNA,或者是非特异扩增

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未来9

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可能是非特异性扩增产物。应该优化PCR反应,比如提高退火温度(首选)、减少酶量(首选)、降低镁离子浓度、降低模板浓度、降低引物浓度等等。如果不行,还可以重新设计引物,增强引物的特异性。

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大草原的小灰驴

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上方有条带,考虑是否为细菌蛋白崩解的产物,或者是扩增过程中没有复制的产物呢?请您具体上传图片看看哪里是正常条带上方呢?

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bamboopiggy

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可能是你菌落里的质粒浓度高,也一起显出来了

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