构建的融合蛋白，为什么看不到红色荧光！

相关实验：用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验

dxy_4uyyu09r

2022-04-02

很奇怪，是一个新基因没有合适的抗体，构建了一个融合蛋白竟然连荧光都没有了，做wb也曝光不出来条带，有没有有经验的帮忙解答一下

2 个回答

bamboopiggy

2022-04-03

有帮助

你质粒构建的时候,去掉你那个基因的stop code了吗？另外注意rfp的读码框别移位了。

天一湖医者

2022-04-02

有帮助

与所选荧光蛋白特性有关，比如维多利亚多管水母中分离出了第一个绿色荧光蛋白GFP，含有约238个氨基酸，27KDa，其中第65-67位(Ser-Tyr-Gly)通过自身环化和氧化形成发色基团。另外，GFP不需要与任何底物作用，仅在长紫外光或蓝光下就能发出绿光。比如珊瑚虫中也有绿色荧光蛋白ZsGreen，它的亮度高于EGFP。由于突变GFP得不到红色荧光。