求大佬给点思路/::<

是你自己做的质粒么？如果不是，是问别人要的话，建议你去测一下序，可能质粒本身有问题，另外找你同僚要他的质粒，当阳参试试，是不是你的酶切条件不合适。酶的浓度高？切的时间长？用了不同的buffer？

有可能是
1，你的酶的量过大
2，甘油浓度过高
3，切的时间过长

把酶量减少，酶切时间减少，再检查一下你的载体序列，是不是还有这两个酶识别的位置。