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AAV病毒纯化方法及感染细胞的实验方法,及相关注意问题?

相关实验:痘苗病毒纯化实验

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丁香实验

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AAV的纯化

1) 向病毒浓缩液中添加固体 CsCl 直到密度为1.41 g/ml(折射率为1.372);

2) 将样品加入到超速离心管中,用预先配好的 1.41 g/ml CsCl 溶液将离心管剩 余空间填满;

3) 在 175,000 g 下离心24 小时,以形成密度梯度。按顺序分步收集不同密度的 样品,取样进行滴度测定。收集富集有AAV 颗粒的组分;

4) 重复上述过程一次。

5)将病毒装入100 kDa的透析袋,4度透析脱盐过夜。此即为纯化的AAV病毒

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