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qPCR荧光染料的选择

实时定量技术,是指在PCR体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,具有特异性强、自动化程度高等特点。因此已得到广泛应用。目前我们用的最多的就是SYBRGreenI(Molecular probes)和EvaGreenTM (BIOTIUM, USA) 这两种荧光染料。EvaGreen荧光染料与SYBRGr ...

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血培养操作指南

当微生物侵入血液迅速繁殖超出机体免疫系统清除这些微生物的能力时形成菌血症或真菌血症(统称血流感染),并可感染血管外组织,属临床医学急症,应尽快采集血液进行培养。资料显示,菌血症或真菌血症发病率近10年来持续增加,2007年美国共报告菌血症发生66万例,在各种感染中居首位,且死亡率高(20%~50%)。血培养是采集患者血液标本并接种到培养瓶中,用以发现、识别引起菌血症或真菌血症的病原微生物,是诊断菌血症和真菌血症的基 ...

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葡萄球菌常见药敏试验结果的解释及修正

1、如果葡萄球菌对庆大霉素耐药,则该菌同时对除外链霉素以外的氨基糖苷类抗生素耐药。 2、如果葡萄球菌对青霉素耐药或!内酰胺酶阳性,并对苯唑西林耐药则表现为对全部β内酰胺类抗生素呈多重耐药性。应对全部β内酰胺类抗生素的结果进行修正,判定为耐药。 3、如果葡萄球菌对青霉素耐药或β内酰胺酶阳性,对苯唑西林敏感,其耐药性可能是由获得性β内酰胺酶引起,常表现为对青霉素类抗生素耐药,但是对含有β内酰胺酶抑制剂的青霉素类抗生素仍有活 ...

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抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体检测的应用进展

类风湿关节炎(rheumataid arthritis,RA)是一种以慢性关节炎为特征的系统性自身免疫性疾病,该病如不及时诊断治疗,即可出现软骨和骨的侵蚀性病变,造成关节结构破坏,最终发展成为关节畸形、强直,导致不同程度的残疾,因此早期诊断至关重要。但是,目前的诊断均依据1987年美国风湿协会修订的RA分类诊断标准,其中临床实验室诊断最常用的是检查血清中的类风湿因子(rheumatoid factor,RF),由于RF受 ...

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抗环瓜氨酸肽抗体(CCP抗体)检测

类风湿关节炎(RA)是一种自身免疫性疾病。由于一方面自身免疫的病理机制决定了这类疾病的疑难和复杂;另一方面由于这类疾病累及多个系统和器官,临床表现较为复杂。所以RA以往在临床上更多的表现为“疑难杂症”。随着自身免疫性疾病基础研究和实验学科的进步,以及众多先进的临床检测手段的采用,类风湿关节炎的临床诊断和治疗逐步开始了科学的、规范的“循证诊断”和“循证治疗”。 类风湿性关节炎患者可以合成与瓜氨酸肽结合的免疫蛋白,80-90 ...

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凝血因子检测的临床意义及应用

因血浆中某一凝血因子缺乏造成凝血障碍并引起出血的病证分为两大类: ①遗传性凝血因子缺乏性疾病。其特点是常自幼发生出血症状,有遗传家族史,除血友病甲和乙为性染色体隐性遗传外,一般均为常染色体隐性遗传,男女均可患病,常有近亲结婚史。该组疾病均为单个凝血因子缺乏,其中以Ⅷ因子缺乏(血友病甲)最常见,其他所有因子除Ⅲ和Ⅳ外均可缺乏。 ②获得性凝血因子缺乏性疾病。均为多因子缺乏和有原发病, 常见的如维生素K缺乏症为因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ缺乏,还有严 ...

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浅谈临床医学检验的现状和发展

作者:叶长城(北海市铁山港区妇幼保健院 广西北海 536016) 【摘要】 伴随着医疗水平的不断提升和发展,我国的医学检验也赢来了一个快速的发展期,医学检验也在临床诊断和治疗中发挥着越来越重要的作用,现今临床医学检验工作已经渗透到了临床医疗的每一个环节,为临床疾病诊断治疗提供最直接的科学依据。本文对就临床医学检验现状和发展展开了相关的探究,探寻存在问题,从而更好的完善,使其发挥出其应有的作用。 【关键词】临床医学检验 现状 发展 研究 医学检验作 ...

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关于清洗机的常见问题

1、实验室洗瓶机的理论基础洗涤动力学,在德国、美国的大学开创新的学科,研究清洗。(1)要洗干净;(2)保证被洗物不受损害,而且寿命延长。2、实验室洗瓶机的喷淋清洗通过喷嘴把带有一定压力和流量的清洗液喷射出来冲击清洗物的表面的清洗方法叫喷射清洗,它包括喷射清洗的作用力,喷射所用喷嘴,以及喷射清洗液三个部分。重点介绍喷射清洗作用力这部分:喷射清洗作用力:在水基清洗过程中的清洗力,包括清洗液本身具有的清洗力(清洗剂对污染物 ...

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冰冻切片实验技巧(五):局限性

接上一期:冰冻切片实验技巧(四):脂肪组织的处理本期我们来聊聊:冰冻切片的局限性1.时间的限制确实在冰冻切片室经常受到快速出结果的压力,我的经验是欲速则不达,急躁和慌乱容易出错。我们最好的办法就是树立自信,良好的态度及教育外科医生,受到加快制片的催促时应当学会从各方面抵制压力,假如你是一位专业的受过良好训练的冰冻切片家,从切片到染出一张片子只需要几分钟,如果你对组织的处理很粗糙,这个过程可能要几分钟到十分钟,碰到 ...

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PLA(邻近连接)技术简介

PLA技术全称为Proximity Ligation Assay,国内译为邻位连接或者邻近连接技术。PLA技术是一种特殊的免疫分析方法,可用于检测目标蛋白,蛋白相互作用等等。该方法通过一对标记有一段寡聚脱氧核苷酸(单链DNA)的单克隆或者多克隆抗体的探针,即PLA probe(探针),识别目的蛋白,当这两个探针识别同一个蛋白时,两个探针之间的距离靠近,产生了所谓的邻近效应(proximity)。此时,通过加入一段分别与连接在抗 ...

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药品包装用镀铝复合膜剥离强度的检测方法介绍

摘要:剥离强度是反映复合膜材料复合牢度的物理量,是复合膜材料的重要性能指标。本文以Labthink兰光XLW(EC)智能电子拉力试验机测试医药包装镀铝复合膜剥离强度的过程为例,介绍了检测软塑包装复合牢度的监测方法及试验原理、设备参数等信息,为企业监控包装热封强度及选择相应的检测设备提供参考。关键词:复合牢度、剥离强度、智能电子拉力试验机、药品、镀铝复合膜、软塑包装、分层1、意义复合膜材料是通过干式复合、挤出复合等复 ...

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基因敲除阳性克隆筛选试剂优选Cruiser™

近年来,ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9等基因组编辑技术可谓是层出不穷,尤其是CRISPR/Cas9,一出现便在全球范围内掀起一股热潮。同时,各大公司也开发出一系列相应的产品,其中一种至关重要的就是基因敲除阳性克隆筛选的试剂。目前用的比较多的有CELI酶,CELI是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶,活性高,不会产生假阳性。而且CELI酶是目前生物界发现的唯一能准确切割异源双链DNA中存在错配位点的酶 ...

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硬胶囊在全球市场的变革

2014年刚刚尘埃落定,对于全球医药工业来说,2014年是一个丰收年。FDA的审批效率有了质的提升,批准新药数量达到历史新高的41个(图1)。图1:FDA 2014年批准NCE剂型分析按新药剂型来分析新药,不难发现片剂仍然高居榜首,但是胶囊剂与片剂的距离已经小到一只脚就可以跨过。9个胶囊剂的市场前景也非常让人看好,阿斯利康公司的Olaparib胶囊用于治疗卵巢癌,市场预期达到了20亿美元。没有人设想过胶囊能取代片剂 ...

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全自动尿沉渣分析仪与尿干化学分析法、显微镜镜检联合检测

全自动尿沉渣分析仪与尿干化学分析法、显微镜镜检联合检测尿白、红细胞结果分析 全自动尿沉渣分析仪综合应用了先进的流式细胞仪原理、电阻抗法及荧光染色技术,能够全自动定量检测非离心尿液中的红细胞、白细胞等有形成分,是目前国内外较先进的全自动尿沉渣分析仪。而尿干化学分析仪由于操作简易、标本用量少、检测速度快也被越来越多的应用于临床. 1 全自动尿沉渣分析仪与尿干化学分析仪检测尿白细胞结果的比较 尿干化学分析法检测尿液中的白细胞的原 ...

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siRNA,shRNA,dsRNA,miRNA间的区别

RNA干扰(RNAi),即用20多个核苷酸组成的短的双链RNA(siRNA)代替传统反义核酸进行转录后基因沉默,已经迅速而广泛地应用到基因功能,基因表达调控机制研究等热门领域,并为基因治疗开辟了新的途径。近两年来,这方面的科学论文及报道爆炸性增长,几乎每天都有新的结果涌现。这些论文中,出现了很多与RNA干扰相关的概念,意思很相近但并不完全相同,这里列举了几个常见的RNA干扰相关的名词及其简单的解释:1、 miRNA:在 ...

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影响糖化血红蛋白测定的因素及实验室检测注意事项

张秀明,中山大学附属中山市人民医院检验医学中心主任 糖化血红蛋白A1c(hemoglobin A1c,HbA1c)是评价糖尿病血糖控制水平的首选指标,并且与糖尿病慢性并发症的发生和发展密切相关。近年来,许多国家糖尿病学会和WHO推荐将其作为糖尿病的首选诊断标准,拓宽了HbA1c的应用范围。然而在某些特定的情况下,尤其是当病人有血红蛋白变异体存在时常导致HbA1c测定结果的极度异常或与血糖水平不一致,甚至误导临床;而且 ...

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优化自动尿液分析后显微镜检的判据

图片A:UX-2000全自动一体化尿液分析仪(。 图片B:尿样的显微图像中有许多透明管型和细胞管型互相混杂。 尿液分析(UA)是临床化验室送检量最大的常规检验之一,在筛查、诊断和监测许多疾病时非常有用,适用于所有直接与尿路相关的疾病。 全自动一体化尿液分析仪分析尿液和尿沉渣的全部物理特性和化学特性;然而,用过自动尿液分析仪后,尿液中形成的一些元素(如管型)需要进行人工显微镜检。 泰国曼谷诗丽拉医院)的临床病理医师从剩余的日常尿液分 ...

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床旁即时检验与传统检验医学的碰撞

作者:河南省人民医院心内科 余保瑞郑州大学第三附属医院检验科 石瑛 1 对POCT的认识 床边检测并不是一个新生事物,20世纪50年代,干化学纸片法检测血糖和尿糖就已经应用于临床。1995年美国临床实验室标准化协会(CLSI)正式提出POCT,起草统一的实验室检测和校准标准,并最终于2003年批准通过。 目前,POCT 在中国还没有统一的、标准的中文释义(编者注:根据2013年10月10日发布的,并与2014年02月01日正式实施的国标G ...

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PCR常见问题分析及对策

问题1:无扩增产物现象:正对照有条带,而样品则无原因:1.模板:含有抑制物,含量低2.Buffer对样品不合适3.引物设计不当或者发生降解4.反应条件:退火温度太高,延伸时间太短对策:1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量2.更换Buffer或调整浓度3.重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物4.降低退火温度、延长延伸时间

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冰冻切片实验技巧(四):脂肪组织的处理

接上一期:冰冻切片实验技巧(三) 学会看片子本期我们来聊聊:脂肪组织的处理脂肪组织无疑是冰冻切片者的绊脚石,道理很简单脂肪不会结冰,把温度降低让脂肪变硬可以切出较薄的片子,但是这个温度对同一组织中的其他成分来说显得太低而不合适切片,当脂肪破碎影响切片时这个问题就变得明显,下面是一些我的经验总结。1.尽可能的削掉不需要的脂肪组织当我准备切淋巴结时,我会先检查一遍,小心翼翼地除掉表面及髓内的脂肪,结内的脂肪用解剖刀刮擦 ...

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