Methylation-Specific PCRProtocol written by James HermaundefinedMethylation-specific PCR (MSP) is a simple rapid and inexpensive method to determine the methylation status of CpG islands. This approach allows the determination of methylation patterns from very small samples of DNA, i ...
请问有哪些原核表达载体的mcs含有以下三个以上以下的酶切位点。谢谢AarI CACCTGC,4,8 MfeI C/AATTGAatII GACGT/C MluI A/CGCGTAccI GT/MKAC MmeI TCCRAC,20,18AceII GCTAG/C MscI TGG/CCAAclI AA/CGTT NaeI GCC/GGCAfeI AGC/GCT NarI GG/CGCCAflII C/TTAAG NdeI CA/TATGAgeI A/CCGGT NgoMIV G/CCGGCAhdI Gundefined*N~HNN_...
本是想回答一个网友的相关问题，可我找不到他/她的贴在哪儿，只好自己发一贴。谈一下：有关“KOZAK CONSENSUS SEQUENCE”I.Kozak Sequencehttp://www.sciencegateway.org/resources/kozak.htmMost eukaryotic mRNAs contain a short recognition sequence that greatly facilitate the initial binding of mRNA to ...
伸手党请注意：转帖请注明来自丁香园论坛1：NEBcalculator用途：计算载体连接比例，酶切位点和buffer的选择地址：http://nebiocalculator.neb.com/#!/2: Biomath Calculator用途：溶液稀释、溶液配制计算和核酸浓度的计算地址：http://www.promega.com/resources/tools/biomath-calculators/3：IDT sciTool用途：引物和 ...
Nonradioactive In Situ HybridizationApplication ManualTo select a chapter section, click on the corresponding page number.The chapters below are in Acrobat PDF format .Chapter 1General Introduction to In Situ Hybridization General Introduction to In Situ Hybridization 9I ...
DNA或者PROTEIN序列分析的总思路，含网上软件希望对大家有帮助！此主题相关图片如下：Program FunctionBlastn Nucleotide query against nucleotide databaseBlastp Protein query against protein databaseBlastx Nucleotide query against protein databasePairwise blast Comparison of two nucle ...
第一章1,氨基酸（amino acid）：是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物，氨基一般连在α-碳上。2，必需氨基酸（essential amino acid）：指人（或其它脊椎动物）（赖氨酸，苏氨酸等）自己不能合成，需要从食物中获得的氨基酸。3，非必需氨基酸（nonessential amino acid）：指人（或其它脊椎动物）自己能由简单的前体合成不需要从食物中获得的氨基酸。4，等电点（pI,isoelectric point）：使分子 ...
FISH检测要求使用中性福尔马林（不恰当的pH值会损伤DNA）固定24-48小时。固定时间不足会导致组织较软，在预处理过程中会丢失部分组织和信号。固定时间过长导致组织变脆，不利于切片，也会导致大分子交联情况严重，很难进行消化。福尔马林固定石蜡包埋的组织需要用蛋白酶进行消化以去除多余的组织来暴露细胞。如果消化不足（酶浓度低、温度不适合、时间太短），镜下会出现云雾状组织覆盖在细胞上，无法观测到暴露独立的细胞核，从而降低 ...
【1】请在标题前加上【原创】 【求助】 【交流】 【转帖】 【共享】 【建议】 【求购】 【申请加分】 【旧贴整理】等字样，以使版面整齐并便于浏(【】符号可在智能WB中打"v1",下翻几页就可,或自此拷贝)。【2】请在=No exact sub board=下拉框中选择相应的子版发帖。 NCBI生物信息学研究工具：http://www.ncbi.nih.gov/Tools/NCBI生物信息学研究工具网站由美国国家生物技术信息中心支持。该网站提供了许多程序的链接，内容包括数据挖掘、核 ...
把这个小结拿出来跟大家分享，希望对大家有所帮助，也请大家发帖多多交流，共同进步！1.应该在细胞状态最好的时候,进行病毒接种或复苏;2.接种前头天,进行细胞传代,细胞数量应以能让细胞在第二天内达到覆盖满90%的培养瓶为准,并且一定要在细胞传代后48h内接种病毒;3.第二天细胞长为单层且状态较好时,开始接种病毒;4.先移弃培养瓶中的生长液,用undefinedPBS轻轻洗细胞面3次,最后用移液管吸干净培养瓶中残留的undefinedPBS.为保持培养 ...
看了下面的文章，我觉得◎＃￥％％￥＃◎碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 /25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然不过的了。那么50m ...
Human RNA silences viral DNAMicroRNA plays an unexpected role in the process, researchers report in Science | By Charles Q ChoiRNA silencing can defend against viruses in humans, French scientists report in this week's Science. Surprisingly, say the scientists, microRNA (miRNA) appears ...
基因芯片技术及其应用 基因芯片(DNA Chip) 又称DNA 芯片、DNA 微阵列等等,是伴随人类基因组计划而产生的,是近年来分子生物学及医学诊断技术的重要进展。该技术的突出特点在于其高度的并行性、多样化、微型化、自动化,被认为是生命科学研究中继基因克隆技术、基因自动测序技术、PCR 技术后的又一次革命性的技术突破1 基因芯片技术简介基因芯片将半导体工业的微型制造技术与分子生物学技术结合起来,通过把巨大数量的寡核苷酸、肽核酸或cDNA 固定 ...
三院士PNAS杂志联合发表肝癌研究成果作者:何嫱 来源:生物通 发布者: 吴林寰 类别:新闻扫描近日，由中国科学院北京基因组研究所吴仲义所长及其科学团队与国立台湾大学医学院陈定信院士、陈培哲院士共同合作开展的“肝癌癌症基因组合作研究”计划获最新进展，相关学术论文在最新出版的《美国科学院院刊》（PNAS）杂志上发表。吴仲义教授早年毕业于台湾东海大学，1982年获得加拿大英属哥伦比亚大学遗传学博士，曾先后任职罗彻斯特大学和芝加哥大学 ...
【经验】如何确认RNA的质量各位都知道，提取到质量良好的RNA（包括总RNA和mRNA，以下同）是非常困难，关于RNA的提取技术，我就不说了，为什么呢？或许各位非常关心呢，我是这样想的，我可以看到的资料或者是厂家的说明书，各位也同样可以看到的，内容当然都是一样的了，所以实验做的好不好，主要是心的投入多少的问题，所以希望大家自己多多思考啊！提取技术虽然不说了，但是我可以告诉各位如何准确确认RNA质量的有效方法（可能是 ...
核酸定量检测核酸的定量核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长 260 nm。每种核酸的分子构成不一， 因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg / ml 的dsDNA，37μg / ml 的ssDNA， 40μg/ml的RNA，30μg/ml的寡核苷酸。测试后的吸光值经过上述系数的换算， 从而得出相应的样品浓度。测 ...
:(各位大侠：小弟最近做克隆实验遇到很大的障碍，已经连续三次失败了。请各位大哥帮助分析原因，小弟不胜感激！我克隆的是一个肿瘤标志物的基因片段，长约150bp 。具体过程如下：一，普通PCR，电泳，切下特异条带；二，用QiaGene公司胶回收试剂盒提取特异条带DNA，所得胶回收产物约30ul。取2ul做荧光定量PCR(该方法条件优化已完成)，证实胶回收产物中目的片段含量很高。三，用上海生工的PUCm-T载体试剂盒完成连接反应 ...
【鸡毛蒜皮】之3重组质粒是“筛”出来的吗？重组质粒的筛选是质粒构建的重要步骤，重组子是筛出来的，这个命题没有问题。问题是最关键步骤不在筛选。影响重组质粒构建效率的最关键步骤在于酶切，不管是否是定向克隆还是非定向克隆。酶切的关键在于切干净，彻底的酶切反应是成功的一半，尤其是载体的酶切。1）酶切反应的前提是对质粒载体的大致定量，一般大小的质粒（3－5kb）一次连接的用量在100ng左右，一般挖胶回收的损失在50%左右，为 ...
找了个公司做RNAi，只做构建载体，转染细胞，找到干扰效果好的片段后，做成腺病毒载体，包装之后给我。公司给了个协议，我改了一下，大家帮忙看看要公司提供的东西够不够全面了，因为这个是论文的一部分，所以必须尽可能详尽，也怕写的不够详细公司偷懒赖账。另外有没有提的要求不合理的，也请大家指出。希望协议既要最大限度的满足我的需要，也要兼顾公平。谢谢呀。第一条 服务内容1.1甲方委托乙方完成COMF-shRNA构建、RNAi筛选、腺 ...
琼脂糖糖凝胶电泳，是一门常规技术，需要熟练掌握。1．目的学会常用的DNA琼脂糖凝胶电泳、。2．原理DNA双螺旋分子骨架两侧带有含负电荷的磷酸根，在电场中会向正极方向移动。不同长度的DNA由于受到凝胶介质的阻力不同，表现为不同的迁移率而被分开。3．器材电泳仪，水平凝胶电泳槽和梳子及其制胶模块，250ml三角瓶，微波炉，台式离心机，旋涡混合器，凝胶成像系统，分光光度计，微量移液取样器，1.5ml离心管，双面微量离心管架，试管 ...
