一个高人的实验注意事项——超级有用记不得是在哪里看得了对我的用处相当的大，拿出来同大家分享：实验中的每个环节都很重要忽略任何一个都可能导致实验的失败每个人在实验中都有自己的一些好的细小的习惯例如tip头吸完后马上从移液器上取下来以免忙乱的时候又以同一tip汲取另一种试剂用完量桶或者烧杯后，及时清洗，并放入烘箱。不管大小实验，做完后都要认真做记录。一个枪头如果可以连续吸两次的话，也不能吸，主要是第二次吸时不准， ...

水是实验室内一个常常被忽视但至关重要的试剂。实验室用水有那些种类？能达到什么级别？不同实验对水的要求有那些？这些问题以前对我来说具有一些模糊的概念，前几天参加学校的纯水装置的招标，阅读有关的一些资料，初步了解了相关的知识，现在拿来和大家分享，绝大多数都是本人从外文资料翻译过来的，不当之处还望各位批评。这些资料也包括freecell战友在该版块的精华贴，在此也表示感谢！实验室常见的水的种类：1、蒸馏水（Distil ...

我索要质粒前也是参考了很多丁香园的帖子，所以有些语句可能和以往的范本雷同，请大家见谅哦2007年3月20日主题：explore the possibility of getting *** from your laboratory信件：Dear Dr. **,I am a post graduate student in ***Institute, Chinese Academy of Sciences. And one of my projects focuses on ***. It seemed that the mechanism you ind ...

有句话说得好：试用，是一种生活态度！能让我们的生活换一种方式，无所谓成功与否，尝试着申请都会让工作和生活充满快乐和期待。试了，才会发现快乐，未知，才有更广的世界。丁香通试用中心聚集了各类业界有名的商家所提供的试用机会以及业内人员最真实客观的试用报告，好东西就该亮出来，试用中心9月免费试用装精品来袭，小伙伴们接招吧！新活动：凡申请2件试用装送1个丁当，申请3件送2个丁当，赶快行动吧！参与方式：申请后将对应试用装申请记 ...

核酸基因版作为最热的基础医学版之一，战友们表现都比较热心。为发展本版的中坚及后备力量，繁荣本版，及方便大家以后晋级，专业不错的战友请到此自荐；同时加强交流学习，增进感情，共同提高！凡在本版已发50帖且得分10分以上的战友,为核酸版中坚人才,加1分鼓励.我们拟邀请这些战友参加本版的聚会或网络会议等活动.在此跟帖的战友,当达到上述条件时,自动升为中坚人才，同时加分鼓励。以下列格式进行：①用户名②简单介绍(年级专业及研究方向 ...

1 基因表达调控简介所谓基因调控，是指生物体内控制基因表达的机制。基因调控主要发生在3个水平上，即一是：DNA水平上的调控、转录控制和翻译控制；二是：微生物通过基因调控可以改变代谢方式以适应环境的变化，这类基因调控一般是短暂而可逆的；三是：多细胞生物的基因调控是细胞分化、形态发生和个体发育的基础，这类调控一般是长期而不可逆的。基因调控的研究有广泛的生物学意义，是发生遗传学和分子遗传学的重要研究领域。生物体内决定细胞 ...

《生物实验室安全故事手记》隆重登场！国内第一本依靠网络力量、由专业人士编写而成的实验室安全类书籍!主编 孟博 ID：Biowind实验室通则 副主编 田智 ID：tianx775分子实验室 副主编 向征 ID：jnuxz细胞实验室 副主编　 吴瑨 ID：b01191111微生物实验室 副主编 裴得胜 ID：kaige88动物实验室 副主编　 孙世顷 ID：shiqingsun出版单位：科学出版社原　价：￥ 36.00 元丁香园优惠价：￥ 28.80 元购买方式：丁香淘宝在线购买银行汇款：建设银行　1540 2099 ...

分子生物学研究尤其是病毒研究的过程中，通常要构建cDNA文库。分子克隆（第二版，中文版）介绍的方法一般不能得到全长的cDNA文库；undefined***55i5Fu7Q44wd5J17Rk5zL4xB7xD4w64u04ug8lL5927RIFyC4z66Ol6Dk8ka4uw6L87E74uD6Ol5$89hOFy89TU6Si4ww8d272vFyC6Si4ww7Rk59D8@O6oX6S951Q8@7cDNA文库）。下面这篇文章讲的是一种新的技术，因此将之介绍给大家，但愿对各位有所帮助。首先声明的是，本人在这里不是为某些公司做广告，请勿误会！！！文章来源：www.ebiotrade.com 科研社区 ...

提示：多数资料文件在几M到几十M左右，希望大家留的信箱地址能接受几十M大的附件。目的:增加本版面的服务透明度,更方便地为更多战友服务,也为了防止一些不必要的重复工作,特开辟索取资源帖.跟帖要求:1.格式 ID:资料名称(要写全)邮箱:跟帖日期:2.请正确写清邮箱地址,并注意邮箱的防垃圾功能，确保本邮箱不被拒收。（谨慎使用sina邮箱）如因地址不正确导致信件退回，当月内不再受理。顺延至下月重新索取;3.发帖完毕并得到资源后,不需 ...

做了快一年的分子克隆，犯了很多错误，经历了很多坎坷，也学到了很多东西。分子克隆过程中出现问题最多的大概就是连接了，大家抱怨的也最多，我也陷入在个步骤上很久。经过长时间的摸索我在连接这个问题上有一些体会，在这里跟大家分享一下我的经验，以供和我一样陷入困境及刚开始做克隆的同学参考。关于连接的提问多集中在连接的体系、DNA的用量、vector和insert的比例、连接酶等。但是我认为，连接不成功，问题并不一定出在连接这 ...

　　　技术答疑——“血液基因组提取”　张老师，天根特邀专家。分子生物学博士，具有10多年的分子生物学领域的研究经验。熟悉各种分子生物学实验技术。在我们的沟通中，张老师始终强调：“核酸提取是分子生物学实验的第一步，良好的开始是成功一半。”张老师希望通过丁香园论坛，就基因组提取技术方面与大家共同探讨。以下请站友们就“血液全基因组提取”及相关问题跟帖提问，张老师将作阶段性答复。答疑流程1、提问时间：2009.4.15～2008.4.30；2、 ...

写在前面的话：近一段时间由于参与了院子里的管理，接触到了更多的帖子，感触良多。大家好象都习惯于发帖提问，而很少去浏览一下以前的帖子，但然也有一些资源太多了，寻找起来太麻烦。不过看到一些帖子在那里挂了几天没人应也不愿搜搜的就实在无法理解了。就象才进院子里的新手很关心自己下载资源的权限，只要一看到什么资源就下，至于有没有看那就是另一回事了。鉴于此，我们决定开一个热门问题的专帖来讨论这个问题集中以下并并把它作为静态 ...

放到“精华”帖子中，以期能进一步深入讨论。请大家积极发言，谈谈自己的体会。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction ,PCR)是一种利用耐热的DNA聚合酶在体外扩增DNA的方法,为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。当DNA长度小于2kb时，一般PCR反应都问题不大，均较容 ...

.miRNA实验技术答疑专场microRNA（miRNA）作为非编码RNA的代表，是目前表观遗传学研究的热门领域。miRNA在生物体内发挥着重大的调控作用。通过对靶蛋白转录或翻译过程的抑制，miRNA参与调节细胞增殖、分化、代谢等各个生理过程。此外，miRNA在疾病的调控中发挥重要作用，特别是其可以行使原癌基因或抑癌基因的功能，影响癌症的发生、发展和迁移。由于miRNA含有的核苷酸数量较少，在提取、逆转录和荧光定 ...

LIPOFECTAMINE 2000转染试剂转染步骤此实验步骤设计用来进行24孔板贴壁细胞的瞬时或稳定转染，其为设计用来在生长培养基中直接加入复合物。1. 转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90%。细胞铺板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中（参见表6了解建议的细胞密度）。2. 对于每孔细胞，使用50μl无血清培养基（如OPTI-MEMⅠ培养基）稀释0.8μg-1.0μg DNA。多孔操作可以批 ...

这是根据我写的一个PPT摘录的，希望能有朋友讨论这方面的问题。并拓宽这个领域，讨论epigenetics更广泛的问题。毕竟epigenetics是现在动物功能基因组研究的主流和一个重要方向。1. 印迹基因的概念及重要意义概念:基因组印迹是特指来源于亲本的等位基因进行不对称后成修饰后而导致的单等位基因表达的现象。这种在生物进化中形成的、有规律而又受控的基因失活是机体中基因表达调节的一种重要方式。2. 研究印迹基因的重 ...

本人在做RNA抽提实验中总结了一些需要注意的事项，以及一些抽提各种RNA的常用方法及步骤。希望与大家共同分享：高质量的真核生物mＲＮＡ的提取， 必须使用ＲＮＡ酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活ＲＮＡ酶同步进行的方法，最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的ＲＮＡ酶的活性。同时，避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量ＲＮＡ酶也很重要。下面列举避免ＲＮＡ酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注意事项 ...

最近做大抽，用的是Qiagen Maxi kit, 一开始抽提产量少，因为是公认的昂贵而好用的试剂盒，觉得是自己操作的不好。就仔细研究了说明书，及整个提取过程，得出一些经验。（high copy plasmid）1.摇菌：菌摇得好不好十分重要。整个过程，其他步骤完全按试剂盒说明操作，一般没有问题，唯独摇菌得自己操作。a.个人觉得还是先活化摇菌8h，在稀释后扩大培养较好，不要偷懒。b.摇菌量问题：试剂盒有推荐cultrue volume，我的推荐 ...

慢病毒——基因转移的潜在新载体　　用于基因治疗的载体系统可分为病毒性载体和非病毒性载体两类。目前常用的病毒载体包括逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、疱疹病毒载体、痘苗病毒载体等,但是这些载体均存在不足之处,严重影响了基因治疗的有效性及安全性。在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题,是无法高效转导非分裂期细胞,而腺病毒载体虽然能转导非分裂期细胞,但在体内不能实现目的基因稳定的长期表达,且反复应用容 ...

RNA的提取准备试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)操作步骤:1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板 ...