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【资源】常见蛋白质等电点参考值

常见蛋白质等电点参考值蛋白质 等电点鲑精蛋白 12.1鲱精蛋白 12.1鲟精蛋白 11.71胸腺组蛋白 10.8珠蛋白(人) 7.5卵白蛋白 4.71;4.59伴清蛋白 6.8,7.1血清白蛋白 4.7-4.9肌清蛋白 3.5肌浆蛋白 6.3β-乳球蛋白 5.1-5.3卵黄蛋白 4.8-5.0γ1—球蛋白(人) 5.8,6.6,7.3,8.2γ2—球蛋白(人) 5.2-5.5肌球蛋白A 5.1原肌球蛋白 5.9铁传递蛋白 3.4-3.5胎球蛋白 5.5-5.8血纤蛋白原 4.8α-眼晶体蛋白 6.0β-眼晶体蛋白 5.1花生球蛋白 3.9伴 ...

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【资源】组织与细胞蛋白样品的制备

1 材料和方法1.1 材料1.1.1 组织和细胞的来源:1.1.2 仪器设备机械组织匀浆器低温高速离心机 (40,000 g)超速离心机超生细胞破碎仪超纯水装置1.1.3 试剂三氯醋酸 (TCA)丙酮二硫苏糖醇 (DTT)尿素CHAPSPMSFEDTA乙醇磷酸考马斯亮蓝R350抑肽素A亮肽素试剂纯度均应是分析纯或以上。1.1.4 溶液配制(1) PBS:NaCl 8 g, KCl 0.2 g, Na2HPO4 1.44 g, KH2PO4,溶于800 ml水中,用HCl调pH至7.4,用纯水定容至1 L;(2) ED ...

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<讨论>SELDI技术闲谈

SELDI技术闲谈我总是在黑白之间徘徊,在那灰色的地带游走。一,Seldi的原理。Seldi技术,说来不复杂,ProteinChip和TOF-MS两个部分,有的专家说“蛋白质芯片”这个叫法不正确,当然了,我们以前讲的某某“芯片”是微点阵“Microarray”,不是“Chip”,翻译的问题而已。蛋白质芯片是将传统的生物色谱的表面集团固定到金属片基上,比如Q、NTA、C18这些,所以蛋白质芯片也分成了离子交换、金属螯合、正相 ...

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【整理】八月无人应助帖 加分从优 补充中

【求助】关于明胶酶实验http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6725370&sty=1&tpg=26&age=0【求助】western problemhttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6725679&sty=1&tpg=26&age=0【求助】包涵体洗涤及离子交换纯化问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=67 ...

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【整理】蛋白版2006年07月无人应助帖,请广大战友积极应助,加分从优!

七、八月是应助的淡季,整理蛋白版2006年07月无人应助帖如下(不包括重帖、极不规范帖和错发于版务区帖;其中无标题的不规范帖已用“...... ......."格式代为标出主要内容), 请广大战友积极应助,加分从优!!!蛋白质组学讨论区:。【求助】各位,兄弟我要做分离纯化蛋白的研究课题,但国外有报道,但没有细节,我想做完研究生课题,这能行吗?http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6707916&sty=1&t ...

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【分享】基因 8 电子版

这本书学校图书馆可借的只有一本中文版,另外实验室还有一本。比较贵,中文版售价是198RMB英文版的价格就更贵了,希望需要的同学尽快下载。提供两种格式的英文版和一种格式的中文版。英文名称:GENES VIII中文版名称:基因八本书适用于分子生物学、分子遗传学及相关课程,是从事生物遗传学、生物化学、细胞生物学、基础医学等专业人员进行科学研究的重要参考书。20年前Benjamin Lewin 的Genes一书从根本上改变了当时分 ...

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【公告】《实验室警示录》另开新贴,请继续关注,本贴暂锁

重要说明:本贴公布以来得到站友积极响应,各位的切身体会和经历令大家受益匪浅。不过经过与出版社的协商,我们在后续征稿活动中对稿件的格式将有一定要求,因此我们重新公布了正式征稿帖。在本贴内跟贴的战友可以在新贴中将自己的帖子按照我们的格式要求重新编辑改写后重新投稿(请注明修改版)。或者我们也将对本贴内基本符合或者经改写后能够符合要求的稿件进行逐一审核,可能同投稿人沟通协商改写事宜,希望仍能得到您的支持和建议!本贴暂 ...

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【分享】双向电泳完整操作步骤

(一)第一向等电聚焦1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT,不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管),置室温溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT, Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml,充分混匀。3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液,加入100ml样品,充分混匀。4. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的IPG预制胶条(17cm pH 4-7),室温中放置10分钟。5. 沿着聚焦盘或水化盘中槽的边缘至左而右线性加入样品。在槽两端各1 ...

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推荐胶内酶切的文章(转贴)

觉得是非常实用的的文章,不是泛泛而谈,详细到连如何带手套都包括在内。考马斯亮蓝染色双向电泳凝胶胶内酶切方法的改进廖翔1 应天翼1 王恒樑1 王杰2 魏开华2 黄留玉1 黄培堂1(1、军事医学科学院生物工程研究所,北京 100071;2国家生物医学分析中心,北京 100085)1.2 胶内酶解制备样品用剪刀将200μl Eppendorf 吸头尖端剪掉约1cm,孔的直径约为1mm,用修剪后的吸头从凝胶上戳取蛋白质点,再转入200μl离心管中。每管加入50μ ...

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【原创】膜蛋白抽提方法推荐

哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能,在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白的蛋白质组学分析是被大家看好的辨识新的药物靶标和/或疾病的生物学标记的好方法,并已得到广泛应用。然而膜蛋白通过许多疏水氨基酸残基锚定在膜结构里面,很难溶解在水性缓冲液系统中。为了制备膜蛋白样品,传统的方法是采用“去污剂+机械处理”的操作方法获取膜蛋白,用于增溶的去污剂有离子型(如SDS)和非离子型的(如Triton?-X)等,前者会使多数蛋 ...

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【转帖】HRP标记抗体的方法

酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物,可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。  戊二醛二步法  1. 原理:戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。  2. 标记步骤:  (1) 称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中,于室温静置过夜。  (2) 反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱,用生理盐水洗脱。流速控制在1ml/1分 ...

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浅谈分子伴侣与蛋白质折叠(ZZ)

浅谈分子伴侣与蛋白质折叠作者:贾小宇 本文对蛋白质折叠这一古老的领域的最新发展,尤其是分子伴侣的机理作了一番探讨,对一些新观点和新的实验事实作了介绍,并对一些实验实事作了一些思考,并提出了一些自己的看法。同时预测了结构生物学及技术手段的发展趋势。 生物大分子 分子伴侣 蛋白质的折叠 识别 结合生物大分子的结构与功能的研究是了解分子水平的先象的基础。没有对生物大分子的结构与功能的认识,就没有分子生物学。正如没有DNA双螺旋结构的发现 ...

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蛋白质转导—— 一个富有潜力的技术

曾几何时,人们还沉浸在生物技术,特别是基因操作技术带来的喜悦之中。通过向细胞转移基因,尤其是让基因进入生物体或从生物体剔除基因的确改变了细胞和生物的表型。于是,人们试图利用这些技术制备生物产品,甚至治疗人类各种疾病。但是,自从1990年第一例人类基因治疗临床试验取得成功以来,这个领域总的进展是令人沮丧的。主要的问题还是技术方面的。人们很难将转基因引入细胞和机体,更难以将它们定向地导入特定类型的细胞。即使弄了进去 ...

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【转帖】目标蛋白粗提方法 (虽然转载,但是很棒!)

狭义来讲,提取指制备物与细胞固体成分或其它结合成分的分离,由固相转入液相或从细胞内生理状态转入外界特定溶液环境的过程,即分离前期被提取物从破碎的细胞中释放出来的过程。如果被提取物程固相或与固体结合,提取时由固相转入液相,常称为固液萃取;如果被提取物已经呈液相存在,提取时由一液相转入转入另一互不相溶的液相,这种方法称为液液萃取。  广义来讲,提取又可称为抽提或萃取,贯穿在整个分离纯化过程中,如核酸制备中用氯仿或苯酚反 ...

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【资源】双向电泳操作手册(中文译本)

目 录概述... 1手册的概述... 1双向(2-D)电泳概述... 1手册中使用的标记符号... 2第一向等电聚焦(IEF)的仪器选择... 3第二向SDS-PAGE电泳设备的选择... 4仪器的选择... 6等电聚焦系统的选择... 6第二向电泳的设备选择... 8MultiphorII平板型设备... 8垂直系统... 9实验室技术... 9第一章... 11样品制备... 111.0 样品制备——一般策略... 111.1 细胞破碎的方法... 131.1.1 温和的裂解方法... 131.1.2 剧烈的裂解方法... 151.2 防止蛋白质水解... 16 ...

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蛋白质分离纯化技术研究进展

与传统方式相似,重组蛋白的分离纯化也是利用其物理和化学性质的差异,即以分子的大小,形状,溶解度,等电点,亲疏水性以及与其它分子的亲和性等性质建立起来的。与此相对应的分离纯化方法参见表1。从表1可看出,当前蛋白质的纯化主要是依靠层析和电泳技术。由于重组蛋白在组织和细胞中仍以复杂混合物的形式存在,因此到目前为止还没有一个单独或一整套现成的方法把任何一种蛋白质从复杂的混合物中分离出来,而只能依据目标蛋白的物理化学性 ...

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《蛋白质技术讨论版导读》之 【资源共享邮箱】管理条例

【蛋白质技术讨论版资源共享之一】5分共享 常用蛋白技术电子图书 【蛋白质技术讨论版资源共享之二】1分共享 常用蛋白技术电子图书 致各位战友的几点要求:1.请勿修改登陆密码。2.请勿对外传播本邮箱地址,以及登陆密码。3.请勿更改、删除其中的内容。4.有任何问题,请到丁香园蛋白技术讨论版相应板块讨论。5.为了避免由于访问量和下载量的原因导致信箱被锁的情况发生,请各位站友控制自己单位时间内的下载量。谢谢合作!以上几点请大家多多配合,共同 ...

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【转帖】蛋白质浓缩、干燥及贮存

一、样品的浓缩  生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀,为了保存和鉴定的目的,往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的:减压加温蒸发浓缩通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快,此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。空气流动蒸发浓缩 空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液,表面不断通过空气流;或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室,用电扇对准吹风,使透过膜外的溶剂不沁蒸发,而 ...

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【整理】蛋白版06年2月无人应助贴

整理蛋白版06年2月无人应助贴如下:蛋白质连接的问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5458496&sty=1&tpg=19&age=0dystrophin和dystrophin genehttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5458022&sty=1&tpg=19&age=0等电聚焦的临床应用(主要在检验医学中的)http://www.dxy.c ...

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【资源】2D分析软件 PDquest8.0版

大家好,我有2D分析软件PDquest8.0版 找了好多个网络硬盘,都没找到个免费的够大的空间让我上传,文件35M,下面是软件介绍,不知道大家能不能提供空间让我上传,好东西大家分享嘛!另外我还把2D实验手册上传到miss709@56.com密码123456,请大家去下吧。探索者系列之PDQuest“The Discovery Series”特点“The Discovery Series”系列软件具有如下共同的特点:PDQuest是B ...

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