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我是一个今年刚考上基础医学院研究生的同学，也是丁香园里的新成员。资源中大家共享的帖子我觉得挺好的，就整理了一下，方便更多同学查阅学习。下面是2004年2月14日－2006年6月12日得到版主加分的共享或有价值的帖子。1 【分享】呵呵,俺自己操刀整理的一些东西。分享给需要的战友吧，请自由传播!http://www.dxy.cn/bbs/thread/61104782 【整理】★ ★ ★ PCR讨论版建版以来部分精华贴汇总★ ★ ★http://www. ...
不会释放气体的安全制冷剂：干冰型冰袋问世干冰被广泛应用于－0℃以下温度保存要求的生物、食品的配送与保存。但是, 由于干冰在使用过程中会产生800自己体积的二氧化碳气体，存在爆炸的安全隐患，各个航空公司已经明令禁止使用作为干冰制冷剂。此外，干冰采购、储存与使用十分不方便，价格也比较高，买回来的干冰必须马上使用掉，否则很快就会挥发掉，这大大增加了配送成本。然而，由于没有合适的替代产品来保证少量货物低温配送过程中的低温，干冰 ...
深圳菲鹏生物股份有限公司位于国际化大都市——深圳，是一家以技术创新为核心竞争力的新兴高科技产业生物公司。深圳市菲鹏生物股份有限公司成立于2001年的8月，是大陆乃至亚洲地区最大免疫诊断产品的原料提供商。目前菲鹏生物的产品不仅在国内占有相当大的市场份额，同时还成功进入北美、欧洲等西方发达国家市场。菲鹏生物以研发为立足之本，公司从资金投入、人才引进、福利待遇等各方面保证研发的高速进行。公司每年拿出销售的10％进行产 ...
前几天看到loveyingzi 在PCR技术讨论版有一个旧贴子。 我是一名普通的兽医(E-mail: ydfyfdquam@163.com)，了解过一点附红细胞体。首先，loveyingzi选择研究的兔作为附红细胞体的研究动物，可能不妥。虽然我国于1981年晋希民教授就发现了家兔的附红细胞体，可是那毕竟是形态学的观测。随着最近十几年的分子生物学的发现，很多学者都以16SrRNA的基因序列来作为原核生物的鉴定基因，并且国内外的 ...
碱裂解法抽提质粒原理碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 /25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3M醋酸钾 / 2 M醋酸。让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然不过的了。那么50mM葡 ...
测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序，DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷酸序列的方法。它要求使用一种单链的DNA模板或经变性的双链DNA模板和一种恰当的DNA合成引物。其基本原理是DNA聚合酶利用单链的DNA模板，合成出准确互 ...
厦门大学第二届“荧光PCR－基础与应用”研习班通知(2006年10月31－11月4日，厦门)荧光PCR技术在疾病的快速诊断、病原微生物的耐药检测和基因突变检测等领域发挥了重要的作用。为了使更多的检验人员或研究人员能够尽快掌握该技术，厦门大学分子诊断实验室将继续与国外著名科学家合作，举办第二届“荧光PCR－基础与应用”研习班。本届研习班将在成功举办第一届研习班并获得广泛好评的基础上，进一步优化完善培训课程内容，融入 ...
就小量RNA的检测而言，与传统的RNA定量检测手段（如RNA印迹分析）相比，逆转录实时定量PCR(qRT-PCR)更为灵敏。实际上，这一技术足以定量单细胞的RNA水平。qRT-PCR应用的主要限制因素是结果的高不稳定性，这源于实验所用生物系统的不同，RNA提取方式的多样化以及逆转录反应和PCR效率的差异。 所有这些变量都使得实时定量PCR结果难以进行标准化处理。用于量化qRT-PCR结果的策略不止一种。其中的一种方法 ...
结核杆菌可以导致全身性疾病，特别是在发展中国家，其发病率较高，危害性极大.近几年结核杆菌的变异性较大，对抗痨药物的耐药性增加，从而使结核病的发病大幅度增高.虽然传统的涂片抗酸染色、细菌培养以及胸片检查对大部分结核能作出正确的诊断，但对某些病人亦可造成误诊或漏诊;动物接种虽特异性较高，但因时间较长，不能满足临床快速诊断的需要.近几年也出现了几种快速诊断方法，但也存在较大的缺陷，如短期培养后抗原免疫原性分析，即用放免 ...
PCR条件对反应的影响变性温度与时间模板变性温度是决定PCR反应中双链DNA解链的温度，达不到变性温度就不会产生单链DNA模板，PCR也就不会启动。变性温度低则变性不完全，DNA双链会很快复性，因而减少产量。变性温度太高，又会影响酶的活性。一般情况下可设为94℃20-30秒，高温时间应尽量缩短，以保持耐热DNA聚合酶的活性，最高变性温度不宜超过95℃。退火温度与时间退火温度决定PCR特异性与产量。温度高特异性强， ...
一个PCR相关的专业网站，内容很全http://www.pcrlinks.com/实验方法与步骤详解http://swjsx.ntmc.edu.cn/Protocol/home.htm美国AXYgen公司http://www.axygen.com/NewFiles/pcr.htmlhttp://www.alkami.com/This 158 page PCR manual covers the following topicsPCR Primer designPCR M ...
一、PCR技术及步骤 聚合酶链式反应（PCR） PCR扩增产物的克隆 上述两个实验包含基本原理、步骤、问题等。二、PCR常见问题汇总1. 没有得到扩增产物 （1）酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 （2）模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。 （3）变性温度是否准确：PCR仪指示温度与实际温度是否相符，过 ...
第一个：LOCUS AY651315 1275 bp mRNA linear INV 22-AUG-2004DEFINITION Plasmodium falciparum isolate 2300 putative chloroquine resistancetransporter (crt) mRNA, complete cds.ACCESSION AY651315VERSION AY651315.1 GI:51317937KEYWORDS .SOURCE Plasmodium falcipar ...
本内容需要回复后才能下载！ 本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除荧光光谱学原理(高清版)--Principles of Fluorescence Spectroscopy 3rd Edition (J.R. Lakowicz)The third edition of this established classic text reference builds upon the strengths of its very popular predecessors. Organized as a broadly usef ...
上游5-TCCGTAAAGACCTCTATGCC,下游引物5-GCTCAGTAACAGTCCGCCTA,大鼠b-actin内对照.原始基因如下:1: NM_012580. Reports Rattus norvegicus... LinksLOCUS NM_012580 1600 bp mRNA linear ROD 07-JUN-2005DEFINITION Rattus norvegicus heme oxygenase (decycling) 1 (Hmox1), mRNA.ACCESSI ...
Stormstar Real Time PCR Master Mix SYBR GREENStormstar SybrGreen PCR Master Mix产品名称Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix价 格说明书DBI-2143200 Reaction2400元DBI-21441000 Reaction11800元DBI-217340 Reaction500元●产品内容 名 称数 量Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix1ml×5支●产品 ...
简并引物设计实际操作步骤 启因生物一、利用ncbi搜索不同物种中同一目的基因的蛋白或cDNA编码的氨基酸序列 因为密码子的关系，不同的核酸序列可能表达的氨基酸序列是相同的，所以氨基酸序列才是真正保守的。首先利用NCBI的Entrez检索系统，查找到一条相关序列即可。随后利用这一序列使用BLASTp(通过蛋白查蛋白)，在整个Nr数据库中中查找与之相似的氨基酸序列。二、对所找到的序列进行多序列比对 将搜索到的同一基因的不同 ...
LAMP引物设计的在线网站(http://primerexplorer.jp/e/)，只要导入靶基因就能自动生成成组引物。以某一微生物的鞭毛基因为例讲解一下LAMP相物设计的过程：首先单击浏览钮择靶基因序列文件，靶序列默认的是小于2 2 kbp。支持三个类型的文件，普通文本格式（仅含序列）, FASTA格式和GenBank 格式文件。第二，从下面个项中择定参数设定（引物设计条件条件。基于GC含量的自动判断, 起始的参数是特定的：如果GC含 ...
分子克隆技术步骤在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。克隆在生物学中其名词含义系指一个细胞或个体以无性繁殖的方式产生一群细胞或一群个体，在不发生突变的情况下，具有完全相同 ...
