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【共享】单克隆抗体的制备过程

单克隆抗体的制备过程单克隆抗体在现代生物医学中的作用越来越大,它不仅被广泛应用于生化和免疫检测,而且治疗癌症和自体免疫疾病的单抗药物也逐渐批准上市。因此单抗的制备和筛选具有其内在的重要性。动物免疫取4只6周龄雌性BALB/c小鼠皮下注射抗原(20 μg/只),第一次免疫与等量弗氏完全佐剂乳化,0.2 mL/只;两周后进行第二次免疫,抗原与等量弗氏不完全佐剂乳化,皮下注射,0.2mL/只;两周后进行第三次免疫,免疫方法及剂量同 ...

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【整理】血型与亲子鉴定

前两天,有一对夫妻带小孩来做血型办户口。丈夫是A型,妻子是B型,小孩是O型。结果本来很正常,但没想到却在夫妻之间引发了一场风暴。小孩怎么会是O型呢,这对有知识的夫妻开始了思考。特别是在看过报纸的种种报道以后。妻子第一反应是,医院抱错了,这小孩不是她的;丈夫的心情就更坏了,不是A型、也该是B型、当然最好是AB型,怎么会是O型呢,可能...... 一个可怕的后果。   那么血型能作亲子鉴定吗?当然是不能的,它只能在某些特殊情况下可以排除亲 ...

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抗肿瘤特异性抗原预防接种方法的设计和评价

这是我以前翻译的一外文综述,外文现在找不到了,拿出来大家看看,是否有用“抗肿瘤特异性抗原预防接种方法的设计和评价”抗肿瘤特异性抗原预防接种方法的设计和评价我们通过对临床前期小鼠模型的研究,对癌症患者应用肿瘤特异性接种的效果和安全性做出评价。第一批临床实验显示接种的方法是安全的,然而临床应答特别是由疫苗引起的免疫应答仍然缺乏。实际上很多实验到目前为止完成晚期癌症患者的很少,患者期待着抗肿瘤疫苗 的巨大功效。另外在 ...

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(共享)免疫细胞化学常用试剂介绍

一、固定剂  大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽类)的化学性质,并根据需要来选择适宜的固定剂(或固定方法)以及改进固定条件。  目前,免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂, ...

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2004 Database of NAR最后冲刺,积分大赠送,机不可失!

=======================================================2004 Molecular Biology Database of NAR共收录了143个数据库。生物信息讨论板自2003-12-27启动对这些数据库的整理,历时近3个月,这个过程中,广大战友给与了极大的支持和切实的参与,在这里生物信息讨论板代表DXY对所有关心和支持过这项工程的战友表示真挚的谢意。目前大部分已经完成,还剩33个数据库的介绍有待整理。为及时将这宝贵的资源 ...

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【共享】进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子,抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确,而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的 ...

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【信息】枣庄市妇幼保健院招聘简章

枣庄市妇幼保健院招聘简章一、简介枣庄市,山东省四大直辖市之一,位于山东南部,在苏、鲁、皖三省交界处,东依沂蒙山,西频微山湖、南接两汉文化胜地徐州,北临孔孟之乡曲阜、邹城,地理位置优越,交通十分便利,素有“山东南大门”之称。枣庄市妇幼保健院位于交通便利、商业繁华的中心城区—市中区,医院建于1953年,隶属于枣庄市卫生局,是一所集医疗、预防、保健、教学、科研、社区服务为一体的三级甲等妇幼保健院。目前开放床位500余张,职工总数8 ...

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【共享】免疫荧光常用固定剂的特点

为了保持细胞结构的自然状态和组织性形式,通常要经过化学固定来中止细胞中的酶及其他的代谢活动,使其尽可能的保持原有状态。而有些常用的固定剂用得不恰当,往往会造成假象或信号丧失,非特异性信号增高等。我总结了一下常见几种固定剂的特点与各位战友分享常见固定剂的特点比较---------------------------------------------------------------------------------------------------戊二醛 甲醛 冷甲醇/丙酮------------------------------- ...

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(交流)免疫细胞化学技术的某些新进展ZT

转自生物谷网站免疫细胞化学技术的某些新进展免疫细胞化学技术在继续改进和完善中,新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外,80年代,新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述,本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。  【半抗原交联抗体法(Hapten –Coupled techniques)】  近年来,为提高敏感 ...

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(交流)【分享】柱层析

【分享】柱层析极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统极性较大的用甲醇:氯仿系统极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸硅胶柱层析下面介绍我现在惯用的方法:匀浆法。1。称量。200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。2。搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/ ...

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(交流)荧光素标记抗体技术

荧光素标记抗体技术撰稿 金伯泉、赵宁--------------------------------------------------------------------------------  (一) 原理  目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光 ...

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【请教】关于胶体金诊断试剂的一篇阅读理解

做个小测验,看看下面您从下面文章中能得到什么?(仅涉及技术及操作方面)几年前的春天,我移民来到温哥华。同年夏天来到一家生物技术公司工作。在国内作了多年_究员的我,在这家公司的职位是技术员。刚进入实验室没几天,我就发现这个实验室的管理不够规范。举几个例子:实验室的工作人员配少量缓冲液时使用方瓶而不是使用带刻度的量筒。由于大家都那么做,量筒的需求就不大。这样一来,要想找到配液必用的量筒,倒不那么容易了。更使我惊讶的是胶 ...

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【共享】单克隆抗体的制备

抗海带多糖单克隆抗体的制备一 实验目的利用单克隆抗体的制备原理和技术,将纯化的重组钙网蛋白片段(CRT39-272)和海带多糖(laminarin)偶联作为抗原免疫小鼠,增强海带多糖的免疫原性,制备抗海带多糖(LAM)的单克隆抗体。 二 实验原理骨髓瘤细胞在体外培养时能大量无限增殖,但不能分泌特异性抗体,而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体,但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞,继承了两个亲 ...

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[讨论] 基因组水平的免疫系统

基因组水平的免疫系统=======================================================很久以前就想和大家讨论一下这个话题!我相信有许多人一看到这个题目就会有同感的!早在1990年,Jorgensen在矮牵牛中发现的一种转基因同时抑制相应内源基因及自身表达的基因沉默现象。后来发现在线虫、果蝇等动物中也存在这一现象。这一现象现在称之为共抑制(co-suppression)!1994年由Macino和Cogoni在粗糙脉孢 ...

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(交流)免疫扩散

免疫扩散l 单向免疫扩散(single immunodiffusion)1.取一块玻璃板,用水冲洗干净后,再用少量75%乙醇冲洗,晾干后置于水平台备用。2.将1% 琼脂糖(agarose)融化,56℃水浴中保温。3.取15ml 琼脂糖加到56℃预热玻璃管中,加入适量抗血清(约200μl),充分混匀后铺于玻璃板上。4.待凝胶凝固后打孔(直径3mm)。5.将系列稀释的标准抗原和待检抗原分别加到凝胶孔中,每孔5μl。6.将凝胶板置于湿盒内,室温过夜( ...

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(共享)抗原、抗体、抗体血清、细胞因子等标准品,欢迎总结!

试剂 剂型 13059143940/13380091861第一页重组人Activin A冻干粉 标准品 5 units / ampoule人甲胎蛋白冻干粉 标准品 100,000 IU / ampoule.氨基羟丁基卡那霉素冻干粉 标准品 50,600 IU / ampoule两性霉素B冻干粉 标准品 . 940 IU / mg(含约50mg两性霉素B)Ancrod冻干粉 标准品 55 IU / ampoule炭疽芽孢疫苗,34F2菌链孢子悬液冻干粉 1 IU / ampoule人抗A型血清冻干粉 标准品 470 IU / ampoule人抗A型血清冻 ...

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【转贴】专业技术人员创业与职业规划(三)

[专业技术人员创业与职业规划(1) 评论(1)发表时间:2006年11月24日 9时31分 一、 定义生命科学专业技术人员的属性 是不是一见这个标题感觉就像是上课? 生命科学专业技术人员,就是在读或完成了生命科学基本学历教育的人,他们将来或正在从事与生命科学相关的实验、开发、生产、项目管理、技术管理等工作,而不是那些具有生命科学背景而从事市场、销售、人力资源、财务、行政管理等工作的人员。如此界定,下面还有用。 专业技术人员的共性:接受过较系统的生命科学教育,对实验研究有一定了解,相比对人和事的关注更热衷对技术的钻研,思维逻辑性强,务实,唯物。但也有很多不足:过分强调技术在任务中的重要性,不了解资源在任务中的作用,因此易于偏离方向,缺乏团队意识,在团队中角色不明确,沟通能力普遍不强,甚至于害怕与人沟通,缺乏领导力,往往以技压人,对自己持有的技术设置神秘感,对技术以外的知识非常缺乏。 综合来讲,专业技术人员,在业务上的能力和成绩是值得肯定的,但在处事、协调、领导等方面还有很大不足,当然这方面也是因人而异的,只是希望大家能对照自己,找到自身的不足,这才是立业的根本。 因为我们,包括我自己,在

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(求教)再次请问有关冰冻切片的问题

我现在准备做大鼠心肌组织的冰冻切片(研究心肌细胞膜上的钾离子通道蛋白),按照丁香园学友的帮忙,取标本后先放在液氮中,随后4%多聚甲醛磷酸缓冲液后固定标本后,再放入20%蔗糖PB液,直至组织块沉底。本打算今天高高兴兴去做冰冻切片免疫组化(SP法),但是帮我做切片的病理科技术员说:蔗糖泡过的标本非常软,均无法切片,以前他也遇到过类似的问题。具体原因他也解答不清。不知哪位学友帮忙解答?1 是否我们医院病理科冰冻切片机比较不好, ...

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【共享】cAMP/cGMP定量分析试剂盒如何选择?

cAMP/cGMP(环磷酸腺苷/环磷酸鸟苷)是一种环状核苷酸,以微量存在于动植物细胞和微生物中。有人称其为细胞内的第二信使,而称激素为“第一信使”。cAMP(或cGMP)由腺苷酸(或鸟苷酸)环化酶产生,而被磷酸二酯酶降解,因此激活腺苷酸(或鸟苷酸)环化酶或者抑制磷酸二酯酶可以提高细胞内cAMP(或cGMP)的含量。研究发现,cAMP(或cGMP)特异性磷酸二酯酶的抑制剂可用于人类疾病的治疗。如cAMP的封闭剂,增强β肾上腺 ...

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【进展|热点】Life Sciences:酗酒引起免疫功能减低的机制

酗酒引起人类肥大细胞的凋亡1.背景:目前认为酗酒可导致免疫功能抑制,而增加感染的机率,但是确切的机制不明。肥大细胞(mast cell,MC)属于固有免疫系统,可抵御细菌和寄生虫的感染。本文章主要研究了乙醇及其代谢产物乙醛对肥大细胞生存能力、增殖能力和凋亡的影响。2.方法:采用3种细胞系,分别是人类肥大细胞系(HMC-1)、小鼠骨髓干细胞诱导的肥大细胞系(mBMMC)和人类外周血诱导的肥大细胞(HuMC)。用H3掺入法、台酚 ...

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