【共享】免疫荧光常用固定剂的特点

为了保持细胞结构的自然状态和组织性形式，通常要经过化学固定来中止细胞中的酶及其他的代谢活动，使其尽可能的保持原有状态。而有些常用的固定剂用得不恰当，往往会造成假象或信号丧失，非特异性信号增高等。我总结了一下常见几种固定剂的特点与各位战友分享

常见固定剂的特点比较
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戊二醛 甲醛 冷甲醇/丙酮
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适用固定组分 微细结构（微管定位） 较广 常检测细胞骨架
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剧烈程度 最剧烈 较稳和 作用快
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对抗原抗体影响 形成交联 不形成或可逆 可以造成抗原
可以阻止反应 影响小 定位分布的改变
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产生荧光 可产生自发荧光 不产生 --------
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固定及渗透 固定强，渗透弱 固定较弱渗透强 固定同时造成透化
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使用浓度 0.01%~0.5% 2%~4% 50%
作用时间 20m~1h 10m~30m 10m~30
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可见戊二醛的固定效果最强，甲醛（多聚甲醛）较温和，为荧光的首选，为了有良好的固定效果，可以两者合用，，冷甲醇/丙酮因为和细胞的蛋白沉淀而不能更好地保持细胞的组织形态，不作为首先，常作为透化的选择，另外还有很多的固定方法，各位战友可以到《生物谷》看一下。