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【讨论】单抗技术相关总结与讨论

单抗技术相关总结与讨论一、前言1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。制备单克隆抗体包括动物免疫、细胞融合、选择杂交瘤、检测抗体、杂交瘤细胞的克隆化、冻存以及单克隆抗体的大量生产,要经过 ...

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【进展|热点】Immunity: NKR-LTi 细胞

NKR-LTi 细胞文章出处:Regulated expression of nuclear receptor RORγt confers distinct functional fates to NK cell receptor-expressing RORγt+ innate lymphocytes. Immunity. 2010. 33:736-751主要内容:LTi细胞(lymphoid tissue inducer cells)是第二类固有免疫细胞,主要存在于肠道的淋巴组织中,转录因子ROR ...

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【进展|热点】Nature Immunology:miR-29通过作用于IFN-γ而参与针对胞内细菌感染的固有免疫与获得性免疫应答

刚刚在线出版的Nature Immunology的一篇文章,涛哥的作品。内容简介:IFN-γ是免疫系统抵御病菌入侵的重要因子,其主要有NK细胞和T细胞产生,前者是固有免疫应答的重要力量,后者则是获得性免疫不可或缺的组成部分。以往的研究发现,若特异性敲除小鼠T细胞内Dicer(参与microRNA生成的关键性酶),则可以引起小鼠产生较多的产IFN-γ的辅助性T细胞。此外,敲除另一个与microRNA生成密切相关的酶D ...

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【转贴】单克隆抗体技术总结

一、前言1975 年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。制备单克隆抗体包括动物免疫、细胞融合、选择杂交瘤、检测抗体、杂交瘤细胞的克隆化、冻存以及单克隆抗体的大量生产,要经过几个月的一系列实验步骤。 ...

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免疫共沉淀技术路线指南

刚刚在网上看到的。帖出来。希望有朋友会在以后能用到。准备工作:预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS;2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2培养瓶)3. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下,把悬液转到1.5EP管中,4℃,缓慢晃动15 ...

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园子里的兄弟们,免疫学课件你要吗?

分子免疫学■ 01 免疫学概论及分子生物学在免疫学中的应用■ 02 MHC and 移植免疫■ 03 细胞因子及其受体■ 04 CTL effects■ 05 基因工程抗体■ 06 基因免疫■ 07 免疫学治疗 基因治疗■ 08 Tumor immune■ 09 免疫缺陷性疾病■ 10 test for IL-8■ 研究生分子免疫学讲课提纲■ 第1章 免疫应答■ 第2章 MHC分子与移植■ 第3章 细胞因子■ 第4章 细胞毒性T细胞作用的分子机制■ 第5章 基因工程抗体■ 第6章 基因免疫■ 第7章 免疫学治疗■ 第8章 肿瘤免疫■ 第9章 免疫缺陷性疾病■ 第10章 造血干细胞移植基础免疫学■ 01绪论免疫系 ...

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【交流】我国快速诊断试剂市场现状

一、 市场上主要产品种类与主要生产厂家目前,我国已获得FDA批准的快速诊断产品有471项,国产试剂441项,可分为7类,但大部分产品集中在以下类别中前4类:1. 传染病类:a) 肝炎类:乙肝两对半、甲肝、丙肝、戊肝b) 性病类:HIV、TP、淋球菌c) 肠道相关病毒:幽门螺旋杆菌、轮状病毒d) 其他:结核分支杆菌、肺炎支原体、霍乱、疟原虫2. 反应生殖水平的激素类:绝大部分集中在hCG(早早孕)与LH(排卵水平)检测;3. **类:绝大部分集中在吗啡和二甲基安非 ...

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【讨论】免疫学发展史上产生的诺贝尔生理学与医学奖

转载:http://www.sciencenet.cn/blog/user_content.aspx?id=45727免疫学发展史上产生的诺贝尔生理学与医学奖免疫学的经验萌芽是在医学实践中产生,也是为满足古代瘟疫的烈性传染病的临床治疗和预防需求应运而生;免疫学是在人类与传染病斗争过程中发展起来的。从我国接种人痘预防天花的史诗记载开始至今,免疫学发展有三个世纪,历经免疫学的经验时期、免疫学的科学早期、免疫学的转变期、免 ...

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【交流】免疫版无人应助贴自2008年12月份起改手工统计为系统自动统计,此贴关闭!

2008年9月21日至9月30日无人应助贴 【求助】急问:巨噬细胞吞噬实验 【求助】大鼠脊髓固定后可以保存多久【求助】竞争ELISA 确定最适抗原包被浓度的原理 【求助】请教纯化鱼IgM的方法 【求助】酵母内的病毒样颗粒可以做免疫组化吗? 【求助】用ELISA法测血尿NGAL蛋白该买哪个公司的Elisa试剂盒 【求助】请问人血清中含有抗GST抗体吗?【求助】斑点渗滤用的NC膜有什么要求吗? 【求助】请教:为什么将胶体金直接滴在NC膜上也会显红色 ...

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【交流】辛酸-硫酸铵法纯化单克隆抗体

1试剂(1)小鼠腹水(2)饱和硫酸铵溶液的配制:  称(NH4)2SO4(AR)400~425克,以50~80℃之蒸馏水500ml溶解,搅拌20分钟,趁热过滤。冷却后以浓氨水(15N NH4OH)调PH至7.4。配制好的饱和硫酸铵,瓶底应有结晶析出。(3) 0.06M, PH4.8醋酸盐缓冲液配制:) `0 }2 j2 v. ^  贮存液:' ~. o6 \5 o5 W1

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【共享】分子病毒及生物制药实验室标准操作规程(SOP)

分子病毒及生物制药实验室标准操作规程(SOP)血凝抑制试验的标准操作规程酶联免疫吸附(ELISA)试验的标准操作规程聚合酶链式反应(PCR)的标准操作规程引物设计的标准操作规程质粒提取及纯化标准操作规程质粒线性化及纯化的标准操作规程限制性内切酶酶切反应的标准操作规程T载体克隆标准操作规程蓝白斑筛选标准操作规程DNA琼脂糖凝胶电泳标准操作规程CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞标准操作规程核酸连接试验标准操 ...

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【专题讨论】“靶向干扰素”专题

开个帖子和大家探讨一下“靶向干扰素”这一热点话题。请多多指教!靶向治疗是指借助能与靶部位高度特异性结合的物质作为载体,以有药物活性的物质(如放射性核素、化疗药物、毒素、酶、生物反应调节剂、基因以及病毒等)作为“弹头”,依靠载体高度特异的亲和性,将“弹头”物质尽量集中于靶部位,发挥其生物学功能,减少对正常组织或细胞的副作用。靶向治疗具有以下的优点:利用载体的靶向性提高靶部位的药物浓度,提高了疗效;减少了给药剂量;降低了毒副 ...

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【公告】2006年5月份无人应助贴

5月份ELISA讨论区【求助】Problem of Elispot 【求助】做免疫的各位高手,用什么方法测效价比较好?急! 【求助】ELISA中某缓冲液中的巴比妥的作用 【请教】这种方法可行么?竞争法ELISA 【求助】请问ELISA能否检测细胞的膜蛋白 【求助】求助:间接竞争ELISA方法建立 【求助】细菌对所测蛋白质的影响大吗 【求购】关于Elisa标准曲线优化的问题。 【求助】大鼠IL-1、IL-6试剂盒的说明书 免疫组化讨论区 【请教】免疫荧光标本的保存 【求 ...

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外文综述翻译一篇

外文综述翻译一篇,可在这找到全文,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?holding=npg&cmd=Retrieve&db=PubMed&list_uids=11007358&dopt=AbstractKnowledge about transplantation tolerance gained in primatesStuart J KnechtleS. Knechtle. Current Opinion ...

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原位杂交组织化学概述

一、核酸分子杂交技术1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究,其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,特别是70年代末到80年代初,分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功,核酸自动合成仪的诞生,大大丰富了核酸探针的来源,新的核酸分子杂交类型和方法不断涌现。按其作用方式可大致分为固相杂交和液相杂 ...

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【进展|热点】Nature Immunology: TLR5+ LPDC在消化道细胞和体液免疫调节中的作用

虽然不算是新文章,而且个别实验在有的实验室没有重复出来,但是还是值得一读。Regulation of humoral and cellular gut immunity by lamina propria dendritic cells expressing Toll-like receptor 5该文章发表于2008年Nature Immunology.http://www.nature.com/ni/journal/v9/n7/abs/ni.1622.htmlTLR由13个 ...

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【共享】淋巴细胞转化实验

(1)原理:T淋巴细胞与有丝分裂原在体外共同培养时,受到后者的刺激可发生形态学和生物化学的变化,部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞,并进行有丝分裂,这种方法称为淋巴细胞转化试验(lymphocyte transformation test)。(2)试剂:①1640培养液:广州威佳科技,临用前加入20%犊牛血清(灭活),青链霉素各100IU/ml,用5.6%NaHCO3(经高压灭菌)校正pH7.2~7.4,是为应用培养液。②PHA溶液:上 ...

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【共享】HLA分型技术

HLA分型技术主要组织相容性复合物(MHC)是脊椎动物体内最复杂且具有高度多态性的基因群。1984年George Snell 首次发现小鼠MHC即H-2,1958年Dausset 发现了人的MHC即HLA基因。MHC的表达产物称为主要组织相容性抗原,MHC抗原是有核细胞表面膜蛋白分子,对抗原递呈和免疫信号传递起关键作用。HLA基因,位于6号染色体上短臂上,长约4000Kb。HLA是目前所知人体最复杂的遗传多态性系统,有几 ...

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抗体工程的新纪元 —— SELEX技术

抗体工程的新纪元 —— SELEX技术王全立 邵宁生(军事医学科学院野战输血研究所)詹林盛、孙红琰、刘晓达(军事医学科学院基础医学研究所) 回顾20世纪,分子生物学及其相关学科的发展给科学研究和人类生活带来了日新月异的变化,同时也更新了一些传统概念。比如,自20世纪30年代以来,人们一直认为"所有的酶都是蛋白质"。1986年,Lerner等首次研制成功催化水解羧酸酯的抗体,称之为抗体酶(Abzyme)。1987年,Cech等发现了具 ...

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【共享】Western-blot样品处理注意事项

样品处理及保存(极为重要)1、悬浮细胞样品:把细胞及培养液一起收集到15ml或者50ml离心管中,1500rpm离心3min,弃去上清;加入10ml 冷PBS轻轻吹打,1500rpm,4℃离心3min,弃去上清;反复2次;第二次弃去上清后,用1ml 冷PBS重悬细胞,移入1.5ml微型离心管,2500rpm(500g),4℃离心5分钟,尽量去除所有残留上清,于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况下,一般保存1年,建议尽快检测。 ...

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