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【求助】哪个细胞系是研究细胞凋亡的理想工具?

shao74 最近在做细胞凋亡方面的实验,碰到的问题是手头上的细胞系对凋亡不是很敏感,所以不知哪位有更好的建议,谢谢!freecell 这个不好说啊,看你主要做哪个组织的细胞凋亡,什么因素引起的细胞凋亡。Fasta921 所以要自己筛选敏感的细胞株啊,不同细胞系对同种基因或药物的耐受性不一样的。goldendoctor Hela 是比较常用的,你可以试一下本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法 ...

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【求助】请问有没有什么网站可以分析microRNA在物种间的保守性?谢谢!

wywdxfsh 请问有没有什么网站可以分析microRNA在物种间的保守性?谢谢哈freecell see: www.scichina.com:8082/sciC/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=411501wywdxfsh freecell同学 你介绍的这篇文章写得真好 让我对课题原有的思路产生了新的想法 谢谢!myskite 看不到啊!liqiangs freecell wr ...

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【求助】求助关于EZH2和E2F的信号通路图片

Laurologist 请问有人做EZH2和E2F相关研究的吧?是否可以提供关于EZH2和E2F的信号通路图片,谢分享!liaofengnan 请问楼主要的是不是这两个,希望可以帮到你idczlsq 能否问一下楼上图片出自那篇文章,谢啦本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming

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【求助】请教老师:Ca2+/CaMK与CaMK这两个缩写含义有差别吗?

杜明斗 想劳驾老师(教授\专家\研究生)为我解除困扰,即"Ca2+/CaMK"与"CaMK"这两个缩写含义有差别吗?如有差别,那差别是什么?我知道前者叫"钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶",那么后者中文名称是什么?现正在做的事被这问题卡着壳,求援!求援!!求援!!!感谢!感谢!!感谢!!!liuyk100 Ca2+/CaMK 是Ca2+和CaMK 的复合物,二者结合可以激活下游的MLCK(肌球蛋白轻链激酶),后者使肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化,细胞收缩。请问你 ...

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【求助】泛素化或者SUMO化的特异性的抑制剂

jxh2004 各位同仁,不知道有没有泛素化或者SUMO化的特异性的抑制剂,希望各位高人指教一下!!我的email:biojxh@gmail.comfreecell see: http://basic.shsmu.edu.cn/jpkc/pathology/jiaoxue/xslw/fsdb.pdfjxh2004 非常的感谢!!本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号 ...

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【求助】谢谢,请问ki67、PCNA、P53的英文全称是什么?

东德公民 谢谢,请问ki67、PCNA、P53的英文全称是什么?加急,谢谢zhujoker p53 :also known as protein 53 or tumor protein 53, is a transcription factor which in humans is encoded by the TP53 gene。 p53 is important in multicellular organisms, where it regulates the cell cycle and thus functions as a tumor suppressor that is ...

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【求助】斑马鱼原位细胞凋亡检测怎么做啊?

ziweihua 求助高人啊,我想用斑马鱼整体胚胎检测其细胞凋亡情况,选用的Roche的in situ cell death detection kit, POD. 按照其中的贴壁细胞或细胞涂片的方法做了两遍,可是连阳性对照都没有信号。后来查找到一篇论文中的方法,如下:a,收集胚胎后用PBS清洗,转移到1.5ml的EP管内,4%多聚甲醛PBS固定过夜b,用PBS配制 25%50%75%的梯度酒精,每次5min将胚胎梯度脱水。c,用-20度预冷的丙酮冷冻 ...

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【求助】NC 和mock都代表什么意思?

wywdxfsh 经常看见文献里提到这2个单词,我没搞明白,举个例子,比如我用lipo2000转染一个质粒,在设对照的时候,一个孔只加Lipo2000,一个空什么也没加,那这两个空分别叫什么呢?先谢过走过路过的xdjm,更谢谢留言回复的同志!:)freecell NC: non-specific control,非特异性对照 ,例如你的问题中的“只加Lipo2000”,以探讨某种效应是否由转染试剂影响的。mock: 空白对照,例如你的问题中的 ...

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【求助】一个关于萤火虫荧光素酶报告基因的问题?

zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题,未得其解,恳请帮助。做荧光素酶报告基因的时候,检测的是细胞因子的启动子。换句话说,是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内,通过刺进因素作用后,检测启动子的表达情况。这个是背景。问题是,怎么通过使用内参的方法,去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。因为,个人认为,细胞数对报告基因的表达量影响比较大。谢谢。daidaiyidaidai 好像现在比较常用的是双报告基因检测吧, ...

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【求助】求助细胞信号传导的问题

linxi2003 有人做过PGE2合成通路的吗?毫无疑问,首先磷脂酶A2 (PLA2)催化细胞膜磷脂生成花生四烯酸(AA);其次AA在环氧合酶(主要是COX2)的作用下转化为不稳定的前列腺素H2( PGH2);最后由前列腺素E合酶(主要是mPGES1)将PGH2异构化为PGE2。试想一想,磷脂在细胞膜上,生成花生四烯酸也是细胞膜上,生成后就被释放出去了,而COX2和mPGES1主要存在细胞核的膜上,这个通路怎么能说得通呢。有哪 ...

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【求助】关于正常和肿瘤细胞系miR含量的比较

kunyushan 各位达人,在miR研究中遇到一个问题,想检测正常细胞和肿瘤细胞系中某miR的差别,有肿瘤细胞系,但正常细胞系未买到,且原代培养较困难,请问是否可用正常组织的miR含量与肿瘤细胞系进行比较?谢谢了freecell pubmed检索:“MiRNA PROFILE IN CANCER CELLS AND NORMAL CELLS”, 有很多paper可以解决你的疑问。例如:http://www.nature.com/cr/journal/v18 ...

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【求助】一边文章刚确定的miRNA启动子,我能用吗,用再验证吗

yolanda0818 一边文章刚确定的miRNA启动子,我能用吗,用再验证吗.MBC的文章freecell 应该 需要先验证,再引用。zhujoker 这个我认为得看你要怎么做这个实验了,如果仅仅做miRNAs的生物学或者说是其下游的研究,我想大可不必验证之类的。但是你要做miRNAs的调控的话,我认为你应该是需要验证,但是这样的话会增加的你的实验的难道以及花费,并且如果你不能从其他方面进行论证说明的话你的文章以后也不会 ...

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【求助】求助:Western blotting曝光没有任何条带,也没有背景,为什么?

文竹竹 我最近做western blotting很郁闷。上周用压片盒压片曝光结果还可以,条带很清楚,可是昨天在同样条件下做的结果,什么条带都没有,是白板。为什么?请高手给予帮助!谢谢!二抗?ECL液?liruonan728 二抗出问题?1、二抗本身失活2、二抗被灭活想一想操作过程有无上述失误liruonan728 二抗出问题?1、二抗本身失活2、二抗被灭活想一想操作过程有无上述失误zhongqiuxie 原因太多。一抗问题可能性更大。 ...

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【求助】急!!一个好的基因组文库或cDNA文库有哪些判断标准?

rainbubu 谢谢大家?急切需要答案freecell 这些东西自己那么急于要为什么不能亲自动手,Google搜索一下呢?一个理想的基因组DNA文库应具备下列条件:重组克隆的总数不宜过大,以减轻筛选工作的压力载体的装载量最好大于基因的长度,避免基因被分隔克隆克隆与克隆之间必须存在足够长度的重叠区域,以利克隆排序克隆片段易于从载体分子上完整卸下重组克隆能稳定保存、扩增、筛选参考:www.dlujpk.com/gene/ ...

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【求助】核转录调控因子有哪些

yaoliduli82 本人是个新手,不知核转录调控因子有哪些,抑或哪位高手能否介绍篇文献参考下,敝人将感激不尽~◎!freecell 此帖可以转到生化版。:Dcatonetwo 好像有个FOXP3,我老板研究这个 幸亏没有要我搞catonetwo 你可以自己去查查文献 。。。不过既然是新手 应该先学学如何查阅文献资料 把这本领掌握了 其他手到擒来yaoliduli82 谢谢大家。yaoliduli82 catonetwo wrote:好像有个FOXP3,我 ...

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【求助】做转基因动物的帮帮忙!!

wanglingyun1981 :)各位大虾帮帮忙,用绿色荧光蛋白以及neo构建载体,转染牛成纤维细胞后,开始是绿色荧光还很亮,可是G418筛选一段时间后,会荧光会越来越弱,到最后筛出单克隆,也几乎没有有荧光的单克隆了。原因是什么?有好的解决办法吗?谢谢各位 !!绿色荧光蛋白用的cmv启动子。slytjiaofei 1.开始时的荧光很强,这个很好解释,因为开始时未进行G418筛选,所以发绿色荧光的细胞有两部分,一是未稳定整合的 ...

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【求助】siRNA 设计

麻果果 我想对某一序列的基因进行沉默,在知道DNA 序列号的情况下,能否设计出针对mRNA的siRNA序列?是生物合成的还是化学合成的转染效率要好一些,用什么样的转染载体教实惠?lalala_2004 提交你的基因,找专门的公司搞定,他们有现成的siRNA库。威斯腾 有的文献是用化学合成的,这样比较快,但是都是瞬时转染,载体比较好的目前是病毒载体。可以和我联系,我的邮箱是sc-western@163.comzhujoker 其实si ...

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【求助】求助战友帮个忙:有关基因表达调控。(急)

gn0301 某一基因由DNA转录为mRNA,再由mRNA翻译为蛋白质,最后蛋白质经修饰变成有功能的蛋白,有诸多的调控因素参与其中。我曾听说:蛋白表达的增加,需要基因启动子的活化,或者在转录后水平存在调控,增加mRNA的翻译,总之,可能存在多个水平参与蛋白的合成。想请学基础的战友帮个忙,我急需这方面的权威文献,哪位战友可以奉献在下一篇。非常感谢!邮箱:bai_qx@126.com细胞因子 已发,不知道能不能解决你的疑问。gn ...

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【求助】microRNA与两个靶基因

myskite 网站预测了某个microRNA有两个不同的靶基因,而且,这两个基因都已证实与某一种疾病相关,并两基因间存在相互调控机制。我应该如何设计实验呢?zhujoker 这个说起来很简单啊,但是操作起来是比较麻烦的。首先我还是建议你先用生物信息学软件,多用几个预测一下,因为需要实验验证是比较麻烦的事情。如果可以我建议你分为以下几步来验证你的实验:1.首先构建miRNAs表达质粒!构建质粒注意事项请参考丁香园相应 ...

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【求助】CHIP的问题!急

tuwenqiang1986 我现在在做组蛋白乙酰化,准备用CHIP,可我基因启动子中与组蛋白结合的区域序列找不到,现急需寻找方法,请各位大虾帮忙!还有请问我如果要做近40份样本的CHIP,需要多少钱?freecell 建议楼主参考这篇文献,找点思路:http://www.nature.com/nature/journal/vaop/ncurrent/full/nature07829.html昕彤 弱弱的问一句:CHIP on chip 是什 ...

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