【求助】PI3K/Akt信号通路疑惑?
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小弟研究药物体外干扰肿瘤细胞增殖过程中,发现磷酸化Akt表达可被抑制,但是随着作用时间延长,表达水平反而增强,重复实验,结果还是一样!内参一致!请教各位大侠,这种情况该如何解释?有没有遇到或者文献上看到类似情况的?请多多赐教!不甚感激!
the phenomenon was observed several years ago, may be a feedback exists in the regulation of phosphoralation of AKT,long time treatment with some drugs such as rapamycin can lead to up-regulation of p-AKT.
你能说的详细一点吗?
你的磷酸化AKT被抑制,应该是AKT的磷酸化水平被降低,
处理时间增强后,你的时间是多少?
你的总的AKT的水平有没有上升?
你用什么做的内参?
你的磷酸化AKT被抑制,应该是AKT的磷酸化水平被降低,
处理时间增强后,你的时间是多少?
你的总的AKT的水平有没有上升?
你用什么做的内参?
你能说的详细一点吗?
你的磷酸化AKT被抑制,应该是AKT的磷酸化水平被降低,
处理时间增强后,你的时间是多少?
你的总的AKT的水平有没有上升?
你用什么做的内参?
你的磷酸化AKT被抑制,应该是AKT的磷酸化水平被降低,
处理时间增强后,你的时间是多少?
你的总的AKT的水平有没有上升?
你用什么做的内参?
总的Akt和内参beta-actin都没有什么变化!就是磷酸化Akt(ser473)在药物作用72h后表达反而增强,48h还是较对照组逐渐减弱的!楼上的战友,你实验过程中也碰到过类似情况???
renzhongrenfeia wrote:
总的Akt和内参beta-actin都没有什么变化!就是磷酸化Akt(ser473)在药物作用72h后表达反而增强,48h还是较对照组逐渐减弱的!楼上的战友,你实验过程中也碰到过类似情况???
这一点其实并不难解释,因为你知道PI3K-AKT/PKB通路多数情况下被认定是发挥抗凋亡的作用的,当你把药物作用于肿瘤细胞后,肿瘤细胞自然会启动survival的相关通路,加上72小时你的培养液中药物浓度也会有所变化,因此就可以出现你试验中所出现的现象。
给你推荐一篇文献看看,相信你会有所收获。
Implication of NAG-1 in synergistic induction of apoptosis by combined treatment of sodium salicylate and PI3K/MEK1/2 inhibitors in A549 human lung adenocarcinoma cells.Biochem Pharmacol. 2008 May 1;75(9):1751-60. Epub 2008 Feb 12.
非常感谢doctormy楼主的指教!甚表感激!!!
做标记,认真学习。。
学习了,谢谢斑竹
我找到一张pi3k的信号通路图,你可以去看下,希望对你有帮助
http://www.selleckbio.com/pharmacological_PI3K_Akt_mTOR.html
http://www.selleckbio.com/pharmacological_PI3K_Akt_mTOR.html
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