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牙周膜成纤维细胞PDLC的传代

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倒去培养基,先加入PBS1ml,再加入0.25%胰酶1ml,轻轻晃动培养瓶,使之分布均匀;约10秒。

将培养瓶迅速转至镜下观察,镜下见细胞触角变钝,细胞变圆,将瓶侧立回到无菌台内,到掉胰酶,加入2mlDMEM培养基(内涵20%胎牛血清),终止消化,弯管吹打成单细胞,可再在镜下观察,确定是否吹打完全。

按1:3或1:2传代,加入适量新鲜培养基后,1.5-2.0ml。放入CO2培养箱。

注意:时间宁短勿长。宁愿消化不足也不能消化过,PDLC细胞不能等到细胞长融合再传代,长到80%左右就可以传代了,否则细胞易老化。

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