测定细胞乳酸脱氢酶释放率的若干问题

问：刚买了南京建成的LDH试剂盒，打算用酶标仪检测细胞的LDH释放率，但是有几个问题比较困惑？

1、用96孔板种细胞，密度应该种多大？

2、细胞培养液应该加多少？用1640会影响OD值的测定吗？是否应加上单独培养液作为对照呢？

3、测上清液的LDH时，应该取多少作为样本呢？

4、超声破碎细胞时，需要破碎多长时间？

5、因用96孔板检测，可否将说明书中的液体用量减到1/10？这样会对结果有影响吗？

答：什么细胞？如果细胞分裂速度较慢，我建议1x105-2x105。较快可以降到5x104，培养基100微升，培养基会影响OD值的，最好设对照。LDH，根据细胞产生的量决定样本的量。超声粉碎细胞，超声时间与超声强度有关，同比例下降是可以的。