关于WB电泳的若干疑问

周末也要努力呀

2022-07-06

如图，好多疑问希望解答，感谢！

1.快速制胶，普通分开配置浓缩胶分离胶，预制胶。三者跑出来的条带有差异嘛？自己配胶是在费时间，请问跑出条带质量好的前提下选哪个？

2.小分子20左右，每次转膜都是marker转上去了，蛋白爆不出来，没转上去？小分子转膜注意什么问题呢？

3.现在期刊要整张图原始材料。请问如果一次跑多个蛋白，反复洗脱抗体不会造成曝光结果与实际不一样吗？大家对这个如何处理呢？

Eason老歌迷

2022-07-07

有帮助

第一个问题，我用过预制胶和自己配的胶，我个人还是更喜欢用自己配的，感觉效果更好，当然前提是你一定要混匀。

第二个问题，小蛋白在转膜时一定要注意控制时间。一般湿转半个小时即可。

秋秋欣欣

2022-07-06

有帮助

如果自己配胶技术没有问题的话建议自己配更好一些，如果曝光没有条带可以试试用丽春红染膜，膜上有没有蛋白，从而判断是哪里出了问题

bamboopiggy

2022-07-06

有帮助

1，只要你能灌匀了，灌的胶和预制胶没有啥区别，就是便宜。

2.你20kd的蛋白爆出出来，你确定抗体好使？如果抗体好使，建议你换0.2的膜试试。

3.不建议striping，striping以后的条带不可信