用于DNA疫苗的质粒大规模纯化研究进展

DNA疫苗就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引起免疫反应。但是，质粒DNA传递系统转染细胞的效率比病毒载体低，估计提供给细胞的每1000个质粒分子仅有1个能够到达细胞核并被表达，若要达到良好的免疫效果，就需要大量的质粒DNA。因此，随着DNA疫苗从实验室进入临床研究和批准上市，必须开发质粒DNA的大规模生产技术。本文综述了近年来国内外制备质粒DNA的各项方法，以期为今后设计和开发新型质粒生产方法提供依据。

1细胞裂解在质粒DNA的生产中，第一个关键性步骤是细胞裂解，主要有热激法和碱裂解法。在这一步中，包括所有质粒DNA、RNA、基因组DNA、内毒素和蛋白质等在内胞内组分都被释放出来。大量完整的超螺旋的质粒DNA的释放和回收对取得高的总收率是决定性的。

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