电泳洗脱法回收酶切DNA

1、用合适的酶切割DNA并电泳。

2、于紫外灯下从凝胶上切下所要的DNA带，装入含1×TBE缓冲液的透析代内，用夹子封好袋口，并检查有无漏孔。

3、将透析袋（纵长）与两极间的边线垂直放于电泳槽内电泳，4～5V/cm电泳至DNA贴紧袋壁。

4、取出透析袋，挤出凝胶块，吸出袋内液体放入1.5ml的离心管内，10000rpm离心5min。

5、吸出上清放入离心管内，加入等体积的饱和酚和等体积的氯仿，振荡混匀，10000rpm离心5min，吸出上清放入新的离心管内。

6、加入1/10体积的3mol/L AaAc,2倍体积预冷的无水乙醇，于-20℃放置4～5h。

7、于4℃，10000rpm离心15min，弃上清。

8、用75%的酒精洗涤2次，每次均于4℃，10000rpm离心5min，弃上清。

9、真空抽干，并用适量1×TE溶解沉淀。如此即得所需DNA。