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细胞稳定转染

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问:

有些细胞生长周期很长(如83hours),如果转入诱导其凋亡的质粒后,生长会更慢,细胞数目会更少,这类细胞用什么方法比较容易得到稳定细胞株?希望有经验的战友给予帮助,非常感谢!

答:

如果你转入的是有诱导凋亡的基因,那么这时是得不到稳定细胞株的。建议你改用诱导表达型的载体,先筛选得到稳定的细胞株,然后在实验的过程中,当你需要激活基因表达时,只需要加入诱导剂(比如强力霉素等),这时你就可以观察诱导表达后细胞的生物学效应了,平时培养时,不需要加诱导剂,你的细胞就像其母细胞株一样,可以正常生长。这一类的载体,园里也很多,你可以求助,或者到公司买,挺方便的。

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