细胞稳定转染的方法

求助者：greentrees

搜索了一下，没有找到详细的配制方案

不知道这两个怎么配制阿？

PBSA=PBS+BSA，BSA是买的sigma分装的，浓度1%

PBST中的T是Triton嘛？我看到很多是指Tween，也有说是Triton的，到底是哪个阿？T的浓度多少阿？

爬片的洗液是不是TBS比PBS更好呢？

我要检测的目标抗原在胞浆内。

炸酱面认为：胞浆内的蛋白应该用triton破膜吧，浓度多大的都有，可能和时间有关。

DXY721认为：

1%的PBSA就是称1gBSA溶于100mlPBS中即可。

PBST中的T一般指的是Tween，至少做ELISA用的是指Tween-20，但是你的目标抗原在胞浆内，肯定要破膜释放抗原，才能和抗体结合，所以和楼上的朋友一样，我也觉得是Triton（破膜剂），我裂解细胞一般用1%的TritonX-100.

洗液用PBS和TBS都可以吧，两个都是缓冲液，我们做WB时一般用TBS，但是我同学嫌TBS配起来麻烦，就用PBS代替，做的也很好。养细胞一般用PBS。

具体用PBS or TBS可参考相关文献或者试剂说明书。

dongwp认为：

PBST中的T一般指的是Tween。

要破膜释放抗原，使用TritonX-100（破膜剂），是单独使用的。

洗液用PBS和TBS都可以，两个都是缓冲液，但如果是与磷酸酶有关系时，就必须用TBS。