瞬时转染以Lipofectamine转染试剂为例的操作流程,不同转染试剂参考说明书1)将复苏后常规培养的细胞按照1-3x10^5接种到6孔板中,加入2-4ml的完全培养基,混匀放置在二氧化碳培养箱中37℃过夜2)无菌状态下配置如下溶液:a 用100ul的无血清培养基稀释2ug的待转染的质粒b 用100ul的无血清培养基稀释25ul的Lipofectamine转染试剂(血清的存在会影响转染效率,因此要使用无血清培养基转染)3)将ab溶液混合并摇匀,室温下放置30min左右4)细胞培养至80%单层左右,用无血清培养基洗涤细胞2次,每孔加入1ml的无血清培养基,并将混合后的ab溶液逐滴加入到每孔,按十字方向轻摇混匀,二氧化碳培养箱中37℃培养24小时5)将转染液倒出,换为完全培养基继续培养,培养3-4天后检测蛋白表达量,稳定转染和细胞瞬时转染只有一点最大的区别就是讲基因一开始就整合到细胞染色体上,能够稳定传代,过程中我