非特异酯酶染色的办法及试剂
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问:我做的是细胞,单核细胞的,怎么自己去做呢?我想自己做,谢谢!很麻烦吗?
答:目前用酶组织化学方法标记单核细胞做的人比较少,可考虑采用免疫细胞化学技术,如用CD68, alpha-AT, lysozyme等抗体。
答:我也在查这方面的,单核细胞的标记问题,现在查到的是可以用hoechst标记,Hoechst是能与DNA A—T碱基对特异性结合的双苯并咪唑荧光染料,细胞核着色,紫外光激发下发出蓝色荧光,染色快(1~3 h),标记率 100%,可标记成体干细胞,常用的有Ho33342和 Ho33258。
存在的问题主要是部分干细胞对该染料拒染。Zhou等研究发现,造血干细胞(side popula—tion cells)的 ABCG2泵可以将 Hoechst3342染料排除细胞外。我现在正在查看看Brdu怎么样标记这个细胞,希望能够继续交流。
答:在骨髓片中鉴别单核细胞一般采用非特异性酯酶加氟化钠抑制试验,有商品试剂盒,上海虹桥试剂公司。