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1、引物为非特异性引物,优化扩增条件,可设置梯度Tm,摸索最佳的Tm值;2、引物浓度太高,适当降低引物浓度;3、可通过琼脂糖凝胶电泳确认引物二聚体;4、模板有基因组污染,重新逆转录cDNA
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1)引物与靶序列不完全互补或引物聚合形成二聚体;
2)Mg2+离子浓度过高、退火温度过低及PCR循环次数过多有关;
3)其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增
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