星形胶质细胞的一些经验
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丁香园网友xxxdada的观点为:
1、我取脑的时候是用双镊,先用一把夹住头部,另一把在人状缝下面撕开,要特别小心,别弄出血来,因为出血的话取出的脑组织含血块就会比较多,离心的时候可以看出来,不知各位同仁有没有更好的方法。
2、尽量去除脑膜和血管,PBS清洗干净,胰酶消化37度10-15分钟,消化中止按每10ml胰酶加1ml血清。
3、玻璃培养瓶差速30-40min,过滤75-100um滤网,种植,其实我不大看细胞密度,感觉差不多就好了,呵呵 。
4、纯化的时候如果是在第12天的时候单纯震荡12-18h的话好象并不能活的比较纯化的细胞,而通过差速传代两次则比较好。