【原创】酸性非变性电泳配方

我看很多朋友问到酸性电泳的问题，现在提供我的一个配方，希望对大家有用！
酸性非变性电泳工作液配制：
40%胶贮液(Acr:Bis=29：1）  
4×分离胶Buf(pH4.3,0.24M KOH-HAc)：1.346g KOH, 以HAc 调pH至4.3，Milli-Q定容至100ml。
4×堆积胶Buf(pH6.8,0.24M KOH-HAc)：1.346g KOH, 以HAc 调pH至6.8，Milli-Q定容至100ml。
5×电泳Buf（pH4.4,β-Ala-HCl）：35.64gβ-Ala，以HAc 调pH至4.4，dH2O定容至1L。
2×甲基绿上样Buf：  1ml 1×（pH4.4,β-Ala-HCl）电泳缓冲液，3ml甘油，1ml 0.4g/L甲基绿，5ml dH2O；-20℃贮存。
10％APS  
0.25％考马斯亮蓝染色液：Coomassie blue R-250 2.5g，甲醇450ml，HAc 100ml, dH2O 450ml
考马斯亮蓝脱色液：100ml甲醇，100冰醋酸，800ml dH2O

电泳胶的配制及电泳条件（酸性电泳注意要反转电极，即上槽电极为正，下槽电极为负）：
酸性非变性胶　　　  　17%分离胶(10 ml)　4%堆积胶(5 ml)
40%胶贮液(40%T,3.3%C）  　　　　4.25ml  　　　0.5ml
4×分离胶Buf(pH4.3,0.24M KOH-HAc)  2.5ml  　　　　/
4×堆积胶Buf(pH6.8,0.24M KOH-HAc)  　/  　　1.25ml
水  　　　　　　　　　　　　3.15ml
10％APS　　　　　　　　　　  75ul
TEMED　　　　　　　　　　　  25ul
5×电泳Buf（pH4.4,β-Ala-HCl）  200ml稀释到1L
电泳条件：反转电极，100V恒压约15min，指示剂进入浓缩胶；改换160V恒压，当指示剂移动到胶板底部时，停止电泳，整个过程约60min。
染色和脱色：取出胶板于0.25％考马斯亮蓝染色液中染色约30min，倾出染色液，加入考马斯亮蓝脱色液，缓慢摇动，注意更换脱色液，直至胶板干净清晰背景。