MCF-7细胞的传代经验
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我正在培养MCF-7细胞,在此介绍一下我给细胞传代的经验:
细胞放在显微镜下观察,细胞无污染、退缩,等其长满培养瓶约70%-80%时即可进行传代操作,具体步骤如下:
1、 打开瓶盖,弃上清,2.D-HANK‘S夜(以50ml培养瓶为例,下同)
2、吸管清洗后弃之;
3、加0.25%胰酶2吸管;
4、轻摇晃后置入37度温箱;
5、3-5分钟后置显微镜下观察,见细胞胞质退缩,变圆;
6、吸去胰酶,加含10%FCS的RPMI1640 3吸管;
7、用洗管吹打,见细胞脱落,培养液变混,即可吸出加到新的培养瓶中。
注意事项:若胰酶消化超过时间,见细胞已漂浮,切不可直接倒去上清,可直接加等量的含10%FCS的RPMI1640,吹打后加到离心管中离心5分钟,再弃上清,加入培养基进行传代。