SP 2/0细胞的传代经验
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SP 2/0是小鼠骨髓瘤细胞株,贴壁生长,科室给学生开实验就用此细胞,所用培养基为1640,用小牛血清,浓度15%生长较好。培养孵箱为37度,5%的CO2。
开始将复苏的细胞传到小培养瓶(如25ml),由于细胞分泌各种因子及细胞间的相互作用,因此生长较快,1-2天就可进行传代(当然要达到80-90%的融合)。
消化采用0.25%的胰酶,在显微镜下观察,看细胞形态变圆,而且细胞间界限明显后,或有极少数细胞漂浮起来就可终止消化。
吹打时,动作要轻、快,而且吹管中要吸满液体,这样就不会产生气泡,吹打按一定的顺序进行,将瓶子彻底吹打,尤其是边缘和角落。
传代,先将此瓶细胞只传到一个大瓶中,以保证细胞的数量,小瓶也可保留,继续培养。这样3-4天又可进行传代。