MTT 的操作方法(一)
丁香园
一、MTT 是什么
MTT 是一种粉末状化学试剂,全称为 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。
二、MTT 法用来做什么
简单地说:是一种检测细胞存活和生长的方法。
MTT 主要有两个用途
1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;
2.细胞增殖及细胞活性测定。
三、为何 MTT 可以用来做上述工作
检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在 490nm 波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT 结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD 值),来判断活细胞数量,OD 值越大,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。