小鼠骨髓染色体的快速制备
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目的要求
掌握小鼠骨髓细胞染色体的制备方法,识别小鼠染色体的数目及特点。
实验原理
骨髓细胞具有高度的分裂活性,经秋水仙素或秋水酰胺处理后,使分裂细胞阻断在有丝分裂中期,再经低渗处理、固定、滴片、染色等步骤,可制作较好的骨髓细胞的染色体标本。
实验用品
1.器材:解剖器具、注射器、离心机、离心管、恒温水浴箱、载玻片、酒精灯等;
2.试剂 0.1%秋水仙素溶液、Carnoy’s固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、0.075 mol / L KCI溶液、Giemsa染液等。
3.材料:小鼠
方法与步骤
取材前3~4 h,向腹腔内注射秋水仙素。注射浓度随动物种类不同而异。秋水仙素的主要作用是使分裂细胞阻断在有丝分裂中期,增加中期分裂相的比例。
腹腔内注射秋水仙素3~4小时后, 断头处死小鼠。
取出小鼠的后肢骨,注意不要将股骨剪断,否则容易造成骨髓细胞的流失。