小鼠骨髓染色体的快速制备

目的要求

掌握小鼠骨髓细胞染色体的制备方法，识别小鼠染色体的数目及特点。

实验原理

骨髓细胞具有高度的分裂活性，经秋水仙素或秋水酰胺处理后，使分裂细胞阻断在有丝分裂中期，再经低渗处理、固定、滴片、染色等步骤，可制作较好的骨髓细胞的染色体标本。

实验用品

1．器材：解剖器具、注射器、离心机、离心管、恒温水浴箱、载玻片、酒精灯等；

2．试剂 0.1%秋水仙素溶液、Carnoy’s固定液（甲醇：冰醋酸＝3：1）、0.075 mol / L KCI溶液、Giemsa染液等。

3．材料：小鼠

方法与步骤

取材前3～4 h，向腹腔内注射秋水仙素。注射浓度随动物种类不同而异。秋水仙素的主要作用是使分裂细胞阻断在有丝分裂中期，增加中期分裂相的比例。

腹腔内注射秋水仙素3~4小时后， 断头处死小鼠。

取出小鼠的后肢骨，注意不要将股骨剪断，否则容易造成骨髓细胞的流失。