荧光免疫技术

原理

应用荧光素标记的抗体或抗原进行免疫沉淀反应，然后置于荧光显微镜下观察。此法有利于微量可溶性抗原的检查和鉴定。

 

 

 

材料与试剂配制

1 ．荧光素标记抗体（或抗原）

2 ．待测可溶性抗原（或抗体）

3 ．醋酸纤维膜（ 10cm × 2.5cm ）

4 ． 0.05Mol/L pH8.2 巴比妥缓冲液

5 ．洗涤液 pH10.0 的巴比妥缓冲液。

6 ．液体石蜡

 

 

 

操作方法

 

1 ．取 5 μ l 待测抗原进行膜电泳（见醋酸纤维膜电泳一节）电压 6V/cm~10V/cm ，电流 0.4mA/cm ，电泳 2h 。

2 ．取下膜放入湿盒内，沿抗体槽的位置放一条含标记抗体滤纸条（约 10 μ l ），在室温中孵育过夜。

3 ．去掉抗体纸条，将膜浸在洗涤液中 1h 。

4 ．流水中冲洗 10min ，置室温干燥。

5 ．干后浸入液体石蜡中使其透明 10min 。

6 ．用荧光显微镜观察荧光弧。