PI染色法（活细胞染色）检测细胞凋亡

染料及试剂

1. 含0.1%TritonX-100的PBS缓冲液（pH7.4）

2. PI染液:将PI（碘化丙啶）溶于含0.1%TritionX-100的PBS中，终浓度为50μg/ml，含RNase 100μg/ml，避光保存。

3. 荧光显微镜

操作方法

制备凋亡细胞悬液，浓度为106 /ml；

取1ml的细胞悬液，加10μl的PI染液混合，作用10min；

加入5ml PBS，1500r/min离心5min，弃上清，重复洗涤2次；

重悬细胞，滴片并用盖玻片封片；

结果判断

在荧光显微镜下选用大于536nm的激发光观察：正常活细胞胞核被PI着染呈红色；早期凋亡细胞胞核浓缩，染色加深，或核染色质聚集于核膜一边，呈新月状；晚期凋亡细胞胞核碎裂成大小不等的原形小体，并被细胞膜所包绕，即凋亡小体。