免疫荧光实验
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一、直接法
1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。
2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。
3.PBS洗涤3×3分钟。
4.0.1%伊文氏兰复染。
5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。
6.缓冲甘油封片,镜检。
二、间接法
1.标本固定后,PBS洗涤3×3分钟。
2.滴加一抗,37℃ 40分钟或4℃过夜。
3.PBS洗涤3×3分钟。
4.滴加荧光标记二抗37℃ 40分钟。
5.PBS洗涤3×3分钟。
6.0.1%伊文氏兰复染。
7.PBS洗涤3×3分钟。
8.缓冲甘油封片,镜检。