Strep-tag® 进阶篇-纯化介质和应用范围有哪些？

Strep-tag^®：适用范围广 纯化选择多

由于 His-tag 系统使用 Ni 离子，所以在纯化金属蛋白（多数为酶）时，可能会受到金属间交互作用的干扰，而使用 Strep-tag^® 则不会出现此问题，因 Strep-Tactin^® XT 与 Strep-tag^® 的特异性结合不受金属离子影响。且因其温和的纯化流程，所以还能用于纯化大型蛋白、多亚基的蛋白复合体或是跨膜蛋白，并且保持蛋白功能。以 Strep-tag^® 系统纯化出不同的蛋白，下图为例：

图 1

依据研究项目的不同，各实验室使用不同的表达系统，最常用的有大肠杆菌、哺乳动物细胞、酵母、昆虫细胞或是植物细胞等。但若使用哺乳动物细胞来表达目的蛋白，His-tag 则不适宜，因为系统中的组氨酸会干扰其纯化表现，其他的生产商也不建议这样的使用方式 。而 Strep-tag^® 系统则与这些表达系统都能互相搭配，见下图实验数据：

图 2

全方位的蛋白质研究平台：从纯化到固定分析

除了用来生产高纯度的蛋白，Strep-Tactin^® XT 与 Twin-Strep-tag^® 间的高亲和力更能利用来稳定的固定目标蛋白，以进行蛋白质检测，例如 SPR 分析。以往为了增进目标蛋白的纯度，或进行下游分析，常常研究一个蛋白需要使用好几个不同的标签。现在有了 Strep-tag^® 这个多功能的亲和标签系统，让您的蛋白研究从克隆到分析一次到位。

由于 Strep-tag^® 标签蛋白的纯化在温和的条件下进行，这些靶蛋白通常被广泛的使用于：

• 蛋白质结构与功能研究
• 结晶学，鉴定蛋白质的 3D 结构
• 检测蛋白质-蛋白质交互作用
• 了解配体-受体在生理条件下的相互作用
• 分离活细胞、外泌体

 

两种 Strep 标签及配体的亲和力比较

图 3

Strep-tag^® 

Strep-tag^® 技术原理利用自然界中最强的非共价作用之一：生物素（biotin）和链霉亲和素（Streptavidin）间的相互作用。小标签 Strep-tag^® II 和 Twin-Strep-tag^® 通过生物素结合位点，可逆的结合工程改造后 Strep-Tactin^® 和高亲和力型 Strep-Tactin^® XT。Strep-tag^® 系统具有多重可选择的亲和力范围、可逆结合的相互作用特性，高亲和力、灵活、温和的独特优势，现已成为细胞分离、外泌体分离、蛋白质纯化的高效研究工具。

 

关于IBA Lifesciences 

IBA Lifesciences 创立于 1996 年，是全球创新型生命科学产品生产商。深耕前沿科技创新，基于杰出的专利技术 Strep-tag^® 系统，提供涵盖重组蛋白的表达, 纯化与固定，以及将特定细胞/外泌体从全血/相关体液中分离的系列产品。企业业务遍及全球 40 余个国家和地区，为科研机构和企业客户提供高品质，有竞争力的产品与服务。