材料与仪器
SGM Plus® PCR 混合物的各种成分
纯无菌水
热循环仪
纯无菌水
热循环仪
步骤
1. 参照 ABI 的操作步骤，为待扩增样品准备足量的混合物，每个样品管包含：
(a) AMPF/STR®PCR 反应混合物 21 μl
(b) AMPF/STR®SGM Plus®引物一套 11 μl
(c) Amplitaq gold®DNA 聚合酶 1μl
2. 从每个样品管吸出 30 μl 混合物，或加到单个大 PCR 管中，或加到薄壁微滴定板中，用黏性薄片封板。
3. 从冰箱取出样品，待融化。
4. 混匀样品，甩下管中内容物。
5. 加约 1 ng DNA 到已有适量 SGM Plus® PCR 混合物样品管中，加适当体积的无菌纯水（如 Sigma 组织培养用水）至终体积 20 μl。
6. 同时扩增一个已知基因，作为对照（如作为试剂盒的对照）。
7. 将样品管置热循环仪（如 ABI9700）上，已设定了适当的循环细节的程序，如下，开始运行：
(a)95°C 保持 11 min ± 5s。
(b)94 ± 1°C 保持 1 min ± 2s。
(c)59 ± 1°C 保持 1 min ± 2s。
(d)72 ± 1°C 保持 1 min ± 2s。
8. 重复步骤 7b 到 7d28 次。
9. 60 ± 1°C 保持 45 min ± 5s。
10. 4°C 保温至需要时。
(a) AMPF/STR®PCR 反应混合物 21 μl
(b) AMPF/STR®SGM Plus®引物一套 11 μl
(c) Amplitaq gold®DNA 聚合酶 1μl
2. 从每个样品管吸出 30 μl 混合物，或加到单个大 PCR 管中，或加到薄壁微滴定板中，用黏性薄片封板。
3. 从冰箱取出样品，待融化。
4. 混匀样品，甩下管中内容物。
5. 加约 1 ng DNA 到已有适量 SGM Plus® PCR 混合物样品管中，加适当体积的无菌纯水（如 Sigma 组织培养用水）至终体积 20 μl。
6. 同时扩增一个已知基因，作为对照（如作为试剂盒的对照）。
7. 将样品管置热循环仪（如 ABI9700）上，已设定了适当的循环细节的程序，如下，开始运行：
(a)95°C 保持 11 min ± 5s。
(b)94 ± 1°C 保持 1 min ± 2s。
(c)59 ± 1°C 保持 1 min ± 2s。
(d)72 ± 1°C 保持 1 min ± 2s。
8. 重复步骤 7b 到 7d28 次。
9. 60 ± 1°C 保持 45 min ± 5s。
10. 4°C 保温至需要时。
来源：丁香实验
