细胞系的 DNA STR 谱

一、开始实验前，必须准备以下试剂： (a)蛋白酶溶剂溶解：向 Qiagen® 冷冻干燥的蛋白酶中加适量蛋白酶溶剂。该溶液 2~8°C 保存 2 个月内稳定。 (b)AW 1 和 AW 2 缓冲液：向装有 AW 1 和 AW 2 浓缩液的瓶子中加人适量无水乙醇。AW 1 和 AW 2 缓冲液室温下一年内稳定。 (c)AL 缓冲液：用前颠倒充分混匀。 二、操作步骤 （试剂盒生产商的操作步骤，

1. 参照 ABI 的操作步骤，为待扩增样品准备足量的混合物，每个样品管包含： (a) AMPF/STR®PCR 反应混合物 21 μl (b) AMPF/STR®SGM Plus®引物一套 11 μl (c) Amplitaq gold®DNA 聚合酶 1μl 2. 从每个样品管吸出 30 μl 混合物，或加到单个大 PCR 管中，或加到薄壁微滴定板中，用黏性薄片封板。 3. 从冰箱取

1. 在烧杯中混合以下各成分，制备 4 % 聚丙烯酰胺凝胶（制胶材料：量筒、天平、过滤器（如 Sartolab 150 ml 滤器），真空泵、梳子、0.2 mm 胶隔板、磁力搅拌器、尿素（如 Fisher）、丙烯酰胺贮存液（如Bio-Rad 40 % 丙烯酰胺/BIS 19：1）、无菌纯水（如 Fisher AR 级水）、混合床基树脂（如 Sigma）、过硫酸铵（如 Sigma）、10× TBE

本节包括 2 个主要领域：分析利用GeneScan®分析软件中 DNA 程序收集软件收集到的原始数据，和利用Genotype®软件为前面用GeneScan®软件分析过的 DNA 谱中的指定等位基因名称。 1. 打开凝胶图像，调节对比度，确保所有的颜色都能看清。 2. 设定分析范围在 75 bp 和 450 bp 内定尺寸标准峰值中。 3. 再作一张凝胶图像。 4. 用凝胶自动分道器进行分道