石蜡切片法

显微技术切片方法之一。制法步骤较繁杂，但仍是一适用的传统方法。①固定：取适当大小的新鲜材料如根、茎等，于指管固定液中12－24小时；干燥材料用水浸泡复原，或浸于50％甘油中软化后使用，不须固定或固定。②冲洗：材料反复用常水，最后用蒸馏水彻底冲洗干净，尤其是用铬酸固定的材料，必须将铬酸洗净，否则影响染色。③脱水：材料经10％－100％酒精，逐步脱净水分。一般每步经五1-2小时，愈往上时间愈长，至100％酒精，重复换1次，以保证完全脱水。④透化：用25％、50％、70％、90％二甲苯一无水酒精透化（如材料脱水不净，进入此步，将出现浑浊），每隔2－3小时更换1次，至纯二甲苯，重复换1次，使酒精完全脱除。⑤浸蜡：将指管（连同材料及二甲苯）放入60℃温箱中，取熔点52－56℃的纯净石蜡小块片（或熔融的石蜡）逐步加入指管中，使熔蜡达到饱和，并让二甲苯徐徐挥散，换蜡3－4次，至口尝无异味，如同嚼蜡为止。⑥包埋：将熔蜡及材料趁热倒入预制小纸盒中，调整材料位置，使之疏散均匀，让蜡渐渐冷凝，移浮于水面，至完全凝固。⑦切片：剥离纸盒，切取材料蜡块，于旋转切片机上切成连续蜡带8－15μm厚。⑧粘片：被片上涂一薄层粘贴剂，加1滴水，切取蜡带材料，烫手，烘干。⑨脱蜡：玻片置二甲苯中脱蜡（或不脱蜡）。⑩染色：可在水溶液或酒精液中染色（或二重染色）。复经脱水、透化等步骤，最后封藏，标记。