基因芯片样品制备

互联网2013-11-14

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一般说来应用 DNA 芯片进行实验包括 5 个过程：生物学问题的提出和芯片设计；样品制备；生物杂交反应；结果探测；数据处理和建模。

1 ．样品制备。一般所需 mRNA 的量是以一张表达谱芯片需要 3μg mRNA 计算的

不同组织抽提 3 － 10μg mRNA 所需组织量

考虑到个体差异以及样品在研磨、匀浆等过程中的损失，客户提供的样品量应在上述基础上增加 1-2 倍。

2 样本采集过程关键点．

组织标本采集操作建议规程 ,( 取标本所需关键器材和处理要求 )

注：
· 以下步骤 1 － 5 应在冰上进行且不超过 15 分钟，超过时间会导致样品的 RNA 降解。
· 对肿瘤组织的取材，要求尽可能准确地判定肿瘤和正常组织，例如对于手术切除的整个或部分前列腺，可能要根据冰冻切片报告的结果来判定要进行研究的取材部位。

1 离体新鲜组织，切成多个 1cm3 小块，剔除结缔组织和脂肪组织。胃、肠组织应剪除外膜；肝、肾、脾应剪除门部血管神经，肿瘤组织应将周围的正常组织切除干净（正常组织也应将周围的肿瘤组织切除干净）。

2 在 RNase-Free 0.9 ％生理盐水中漂洗样品，以去除血渍和污物。

3 用铝箔包裹组织，或用 5ml 冻存管装载组织 ( 但最好统一采用铝箔 ) 。用记号笔在铝箔或冻存管外表写明样品编号，并贴上标签，迅速投入液氮冷却。

4 填写样品登记表，写明样品名称、种类、编号、取样日期、样品处理情况等

将液氮冷却的组织放入样品袋（每个样品袋只保存同样的组织），袋口留一根编号绳，绳上粘一张标签纸（标签上注明：样品名称、编号、日期），迅速转入便携式液氮罐

5 保留 1-2 张取材部位的病理切片。