酶切、回收、连接 常识

 

一、 单选题

 

 

1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ）

 

A ．I 类限制酶 B. II 类限制酶 C. III 类限制酶 D. 核酸内切酶

 

E. RNAase

2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是( B )

 

3. 多数限制酶消化DNA 的最佳温度是（ A ）

 

A. 37 ℃ B.30 ℃ C.25 ℃ D.16 ℃ E.33 ℃

 

4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B )

 

A. I 类限制酶反应需要 Mg²⁺ 、ATP 和S- 腺苷蛋氨酸。

 

B. II 类限制酶反应需要Mg²⁺ 、ATP 。

 

C. III 类限制酶反应需要Mg²⁺ 、ATP ，S- 腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。

 

D. I 、III 类限制酶对DNA 有切割和甲基化活性，II 类限制酶对DNA 只有切割活性而无甲基化活性。

 

E. II 类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。

 

5. 如果一个限制酶识别长度为6bp , 则其在DNA 上识别6bp 的切割概率为( D )

 

A. 1/4⁴ B. 1/6⁶ C. 1/6⁴ D.1/4⁶ E. 1/10⁶

 

6. 多数II 类限制酶反应最适PH 是 ( C )

 

A. PH:2-4 B. PH:4-6 C. PH:6-8 D. PH:8-10 E. PH:4-10

 

7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D )

 

A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。

 

B. 许多限制酶对线性DNA 和超螺旋DNA 底物的切割活性是有明显差异的。

 

C. 有些限制酶对同一DNA 底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。

 

D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。

 

E. BSA 对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA 。

 

8. II 类限制酶反应中必须的阳离子是（ C ）

 

A. Na ⁺ B. Ca²⁺ C. Mg²⁺ D. Zn²⁺ E. Mn²⁺

 

9. RFLP 形成的原因是 （ A ）

 

A. 由于遗传变异造成同源染色体中碱基的随机变化。

 

B. 使用不同的限制性内切酶进行切割。

 

C. 杂交时使用不同的探针。

 

D. 每种染色体存在两条。

 

E. 提取不同的染色体DNA 酶切。

 

10. 下列关于限制酶命名的表示方法，正确的是（ E ）

 

A. Sau.3A I B. B.amH I C. pst I D. Ecor I E. Hind III

 

11. 需进行DNA 部分酶切时，控制下列哪种条件最合适（ D ）

 

A. 反应时间 B. 反应体积 C. PH D. 限制酶量 E. 反应温度

 

12. 下列酶在反应中不需要ATP 的是( D )

 

A. E coK B. T₄ DNA 连接酶 C. BamH I D. EcoB E. DNA pol I

 

13. 限制性内切酶可特异性识别 ( B )

 

A. 双链DNA 的特定碱基对 B. 双链DNA 的特定碱基序列

 

C. 单链RNA 的特定碱基序列 D. 单链DNA 的特定碱基序列

 

E 双链RNA 的特定碱基对

 

14. 下列与RFLP 相关的一条是( D )

 

A. 不同限制酶在单个染色体DNA 上的限制性图谱。

 

B. 两种物种个体间的限制性图谱。

 

C. 同一个体等位基因的限制性图谱。

 

D. 同一物种不同个体的限制性图谱。

 

E. 非同源染色体用同种限制酶切形成的限制酶图谱。

 

15 ． 限制酶的星号活性是指在非正常条件下，限制酶（ A ）

 

A. 识别和切割序列发生变化。

 

B. 切割活性大大提高。

 

C. 识别和切割序列与原来完全不同。

 

D. 可以任意切割DNA 。

 

E. 只能部分切割DNA 。