脂肪酸的β

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（一）原理

酮体包括乙酰乙酸、b—羟丁酸和丙酮三种物质。在肝脏中，脂肪酸经b—氧化作用生成乙酰CoA。生成的乙酰CoA可经代谢缩合成乙酰乙酸，而乙酰乙酸既可脱羧生成丙酮，又可经b—羟丁酸脱氢酶作用被还原生成b—羟丁酸，三种物质统称酮体。

酮体为机体代谢的正常中间产物，在肝脏中生成后须被运往肝外组织才能被机体所利用。在正常情况下，动物体内含量甚微；患糖尿或食用高脂肪膳食时，血中酮体含量增高，尿中也能出现酮体。

本实验用丁酸做底物，将之与新鲜的肝匀浆一起保温后，再测定其中酮体的生成量。
因为在碱性溶液中碘可以将丙酮氧化为碘仿（CHI3），所以通过用硫代硫酸钠（Na2S2O3）滴定反应中剩余的碘就可以计算出所消耗的碘量，进而可以求出以丙酮为代表的酮体含量。有关的反应式如下：

根据滴定样品与滴定对照所消耗的硫酸钠溶液体积之差，可以计算由丁酸氧化生成丙酮的量。
（二）试剂及器材
（1）10%（w/v）氢氧化钠溶液：称取10g氢氧化钠，在烧杯中用少量蒸馏水将之溶解后，定容至100ml。
（2）0.1mol/L正丁酸溶液：称取13g碘和约40g碘化钾，放置于研钵中。加入少量蒸馏水后，将之研磨至溶解。用蒸馏水定容到1000ml，在棕色瓶中保存。此时可用标准硫代硫酸钠溶液标定其浓度。
（3）0.5mol/L正丁酸：取0.05ml正丁酸，用0.5mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解即成。
（4）0.1mol/L碘酸钾（KIO3）溶液：称取0.8918g干燥的碘酸钾，用少量蒸馏水将之溶解，最后定容至250ml
（5）0.1mol/L硫代硫酸钠（Na2S2O3）溶液：称取25g硫代硫酸钠，将它溶解于适量煮沸的蒸馏水中，并继续煮沸5min。冷却后，用冷却的已煮沸过的蒸馏水定容到1000ml。此时即可用0.1mol/L碘酸钾溶液标定其浓度。 （6）硫代硫酸钠溶液的标定：将蒸馏水25ml、碘化钾2g、碳酸氢钠0.5g、10%盐酸溶液20ml加入一支锥形瓶内。另取0.1mol/L碘酸钾溶液25ml加入其中，然后用硫代硫酸钠溶液将之滴定至浅黄色。再加入0.1%淀粉溶液2ml，然后继续用硫代硫酸钠溶液将之滴定至蓝色消褪为止。
另设一空白，其中仅以蒸馏水代替碘酸钾，其余操作相同。计算硫代硫酸钠溶液的浓度所依据的反应式如下：

(7)10%(v/v)盐酸溶液：取10ml盐酸，用蒸馏水稀释到100ml。
（8）0.1%(w/v)淀粉溶液：称取0.1g可溶性淀粉，置于研钵中。加入少量预冷的蒸馏水，将淀粉调成糊状。再慢慢倒入煮沸的蒸馏水90ml，搅匀后，再用蒸馏水定容至100ml。
（9）0.9%(w/v)氯化钠。
（10）1/15mol/L、PH7.7磷酸缓冲液
（A液）1/15mol/L Na2HPO4溶液：称取Na2HPO4·2H2O1.187g，将之溶解于100ml蒸馏水中即成。
（B液）1/15mol/L KH2PO4溶液：称取KH2PO40.9078g，将之溶解于100ml蒸馏水将之溶解，最后定容至100ml。
取A液90 ml、B液10 B液，将两者混合即可。
（12）匀浆器（或搅拌机）、碘量瓶。