脂肪酸的β-氧化
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<font>一、实验目的<br />
（1）了解脂肪酸的β-氧化；</font>
<font>（2）通过测定和计算反应液内丁酸氧化生成丙酮的量，掌握测定β-氧化的方法及原理。</font>
<font>二、实验原理</font>
<font>根据β―氧化学说，机体组织能将脂肪酸氧化生成乙酰辅酶A。两分子乙酰辅酶A可再缩合成乙酰乙酸。在肝脏内，乙酰乙酸可脱羧生成丙酮，也可还原生成β<span>-</span> 羟丁酸。乙酰乙酸、β<span>-</span> 羟丁酸和丙酮总称为酮体。酮体为机体代谢的中间产物。在正常情况下，其产量甚微；患糖尿病或食用高脂肪膳食时，血中酮体含量增高，尿中也能出现酮体。 </font>
<font>本实验用新鲜肝糜与丁酸保温，生成的丙酮可用碘仿反应测定。在碱性的条件下，丙酮与碘生成碘仿。反应式如下：</font>
<font>2NaOH+I<sub>2</sub> →<span>NaIO+NaI+H<sub>2</sub> O</span> </font>
<font>CH<sub>3</sub> COCH<sub>3</sub> +3NaOI→<span>CHI<sub>3</sub> +CH<sub>3</sub> COONa+2NaOH</span> </font>
<font><span> </span> 碘仿<span> </span> </font>
<font>剩余的碘，可用标准硫代硫酸钠滴定。</font>
<font>NaOI+NaI+2HCl→<span>I<sub>2</sub> +2NaCI+H<sub>2</sub> O<span> I<sub>2</sub> +2Na<sub>2</sub> S<sub>2</sub> O<sub>3</sub> </span> →Na<sub>2</sub> S<sub>4</sub> O<sub>6</sub> +2NaI</span> </font>
<font>根据滴定样品与滴定对照所消耗的硫代硫酸钠之差，可以计算由丁酸氧化生成丙酮的量。</font>
<font><strong>三、试剂与器材<br />
</strong> 恒温水浴、微量滴定装置、解剖用具、玻璃器皿等。</font>
<font>Locke氏溶液、0.1mol/L碘溶液、pH7.6,mol/L的磷酸缓冲液、</font>
<font>0.2mol/L丁酸溶液、15%三氯乙酸溶液、10%氢氧化钠溶液、10%盐酸溶液。</font>
<font><strong>四、操作方法</strong><br />
处死动物→制备肝糜→丁酸氧化反应→碘仿反应→碘滴定</font>
<font><strong>五、关键步骤与注意事项</strong> </font>
<font>① 用新鲜肝糜进行实验，确保肝内酶活力。</font>
<font>② 注意滴定终点的控制，保证实验的准确度。</font>
