大鼠侧脑室注入β-淀粉样蛋白（Aβ）模型

大鼠侧脑室注入 β-淀粉样蛋白（Aβ）模型是将β-淀粉样蛋白不同的片段 Aβ1-42 或 Aβ1-40 注入脑室或海马等部位，大鼠出现学习和记忆功能损害，海马神经元坏死或缺失凋亡相关基因表达增加。

研究 AD 的病理发生发展过程及药物研发。

器材：

① 常用手术器械

② 缝合线

③ 立体定向仪

试剂：

① Aβ1-40

② 0.4% 戊巴比妥钠

③ 青霉素

1、Aβ1-40 寡聚化处理

注射前，将 Aβ1-40 配置在灭菌 PBS 溶液中（浓度为 10μg/μL），并在 37 ℃ 恒温箱中孵育一周诱导寡聚化，放置冰上备用。

2、AD 模型制备

A. 大鼠经腹腔注射 0.4% 戊巴比妥钠（0.2mL/10 g）麻醉，后固定于立体定向仪上。

B. 纵行切开头皮，双侧脑室置管坐标为前囟 0.8mm，中线旁 1.1mm，硬膜下 3.6mm。

C. 分别向一侧侧脑室缓慢注入 5μL 新鲜配制的 40pmol/μL 的 Aβ1-40，全脑共约 400pmol，注入速度约为 1μL/min，每次注射间隔 2 小时。

D. 留针 2 分钟后拔管，骨蜡封闭颅骨孔后缝合切口。

E. 注射过程中，出血量较大的动物判定为失败，排除在实验之外。

① 该模型的缺点在于 β-淀粉样蛋白本身对脑组织存在局灶性损伤，且存在 β-淀粉样蛋白局部聚集的情况，目前有报道利用微泵微灌注，可较为有效地解决局部聚集情况。

② 用颅骨钻开颅时，注意颅骨表面的筋膜是否处理干净，否则会损伤脑组织和表皮，并注意颅钻深度。

③ 侧脑室注射时一定要严格遵守进针/退针的深度及停针时间，并在推注过程中一定要遵循匀速缓慢原则，否则可能导致动物死亡。

④ 术后腹腔注射青霉素预防感染，45° 进针后回抽，见空气后方可进行注射。若出现血性或其他液体（可能是尿液），则退针重新进行注射。