Ａβ损伤模型

<font>取出生1-2d的乳鼠，用麻醉剂处死。在D-hanks液中取大脑并分离海马组织，胰蛋白酶消化，获得细胞悬液，胎盘蓝染色进行死活细胞记数，将细胞以5×105/ml的密度接种于预先经L-多聚赖氨酸处理的96孔和24孔培养板,其中24孔板中预先放置有盖玻片。细胞维持在培养液中，置入5%CO2，饱和湿度的培养箱中培养，24h后全换液，接种当天为第一天,每3d半量更换培养液一次，培养第3天时加入阿糖胞苷,终浓度为10μmol/Ｌ,以抑制神经胶质细胞的过度增殖,24ｈ后更换全部培养液继续培养,第10天进行细胞造模，开始实验。<br /> <br /> 也可以用PC12细胞株,常规培养<br /> <br /> Ａβ产物诱导海马神经细胞，建立细胞模型：<br /> 选择Ａβ25-35片段,用三蒸水配制成100μmol•Ｌ-1,过滤,分装,-20℃冻存;使用前老化处理并配制成所需浓度。（将Ａβ25-35溶解在DMSO中，在用DMEM稀释，置于37℃下孵育7-14天，即为老化状态）。<br /> <br /> 细胞模型建立:加入浓度为20µmol/L的Ａβ25-35,接触24h,诱导建立AD细胞模型.<br /> <br /> 检测指标:MTT LDH 凋亡 细胞内钙离子 以及SOD等<br /> </font>

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