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聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)实验方法改进

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聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)实验方法总汇

改进一:配胶

背景:在配制SDS-PAGE 胶的时候,加入分离胶的过程中常常会带入气泡,即使用双蒸水来压平界面也有可能因为力度不匀而导致胶面不够齐平,最后使跑出来的相同大小的蛋白条带不在同一个水平面上。

方法改进:所做的改进很简单却很有效,加完分离胶后,用移液枪吸取酒精(浓度没有特别要求,干净无污染就好)加到分离胶上至覆盖界面,静置片刻后放到37℃恒温箱中可加速胶的凝固。待到分离胶完全凝固之后倒去上层的酒精,就可以看到齐平漂亮的界面啦!

改进二:脱色

背景:给染色结束的SDS-PAGE 胶脱色往往需要比较长的时间,否则会由于脱色不完全而导致条带不清晰,影响到拍照的效果。

方法改进:改进的方法很简单易行——取一张我们常常随身携带的面巾纸,打个结放入盛有脱色液的大培养皿里放到脱色摇床上,这样一来,原来过夜脱色达到的效果现在只需要短短的3、4个小时就可以轻松实现了。

PS:希望大家这个时候用的面巾纸是质量比较好不容易掉屑的...

改进三:如何方便地取出SDS-PAGE 胶?

背景:在跑完SDS-PAGE 后,取胶通常是一个问题,由于胶和玻璃贴的比较紧,一不小心就可能把玻璃板弄坏。将胶从玻板上取下的时候胶也很容易碎掉。

方法改进:用流水冲玻璃板的缝隙处(也就是凝胶部分),一边冲一边轻轻掀起玻板,用水去充满玻板和胶之间的缝隙,很容易能把玻板掀开。接下来把玻板反过来,让胶面朝下,使其一端浸入到一个盛着水的大平皿中,轻轻晃动,胶很快就会被水带到平皿中了,丝毫不会损伤胶。

这个方法非常简单,下次你也可以试试哦。

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