离体蛙心灌流及药物的影响（斯氏法）

【目的】 学习离体蛙心制备及灌注方法，观察内环境理化因素的改变和某些神经体液因素及肾上腺素、咖啡因和洋地黄制剂等药物对心脏节律性活动的影响。
【原理】 蛙心离体后，用理化因素类似于两栖类动物血浆的任氏液灌注时，在一定时间内，仍保持有节律的舒缩活动，而改变灌流液的理化性质后，心脏的节律性舒缩活动亦随之改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持正常心脏活动的必要条件。此外，心脏受植物性神经的支配及某些体液因素的调节和药物作用的影响。因此，在灌流液中，滴加肾上腺素、乙酰胆碱及其相应的受体阻断剂心得安和阿托品等药品，可间接观察神经体液因素对心脏活动的影响。
【材料】
（一）动物 蟾蜍
（二）器材 生物 机能系统或BL-420 生物 信号采集系统，张力换能器，探针，外科剪，小手剪，烧杯，滴管，蛙心套管，蛙心夹，铁支架， 试管 夹，眼科镊，丝线，双凹夹，蛙板，蛙足钉等。
（三）药品 任氏液，低钙任氏液，10％洋地黄任氏液或0.1%毒毛旋花子甙K溶液，0.04％洋地黄毒苷任氏液，0.1％盐酸肾上腺素溶液，20％安钠加溶液。
【方法】
1. 取蟾蜍1只，使头向下，将蛙针于枕骨大孔处向前插入颅腔左右摇动，破坏脑组织，再将针插入脊椎管，以破坏脊髓，动物全身软瘫。
2. 仰位固定于蛙板上，先用普通剪刀将胸部皮肤剪开，再将胸部肌肉及软骨剪去，用虹膜剪剪破心包膜暴露心肌。
3. 于主动脉干以下绕一线，左右放平，备结扎用。在主动脉右侧分支下，再穿一线，尽量在远心端扎紧，左手提线，右手以眼科剪于左主动脉上向心剪一Ｖ形切口，将盛有任氏液的蛙心套管，通过主动脉球转向左后方，同时用镊子轻提动脉球，向插管移动的反方向拉，即可使插管尖端顺利进入心室，用主动脉干下的线结扎固定。
4. 剪断两根动脉，轻轻提起蛙心套管，再在静脉窦以下把其余血管一起结扎，在结扎下方剪断血管使心脏与蛙体分离，立即以滴管吸去蛙心套内血液，以任氏液反复冲洗数次，直到离体心脏无存血为止。最后套管内任氏液限定1ml。
5. 将蛙心套管固定于铁柱上，用蛙心夹夹住心尖，连于张力换能器，输入生物机能系统进行信号采集、记录和分析。
6. 用下列药物依次滴入套管内，换药前需用任氏液冲洗数次，并记录一段曲线以作对照。
① 20％安钠加溶液2~3滴。
② 0.1盐酸肾上腺素溶液2~3滴。
③ 先换上低钙任氏液，使心收缩力明显减弱后向套管内加入10％洋地黄任氏液4滴（或0.04％洋地黄毒苷任氏液），3~5分钟后再加入4滴，直到心脏出现房室传导阻断。
【实验记录】
记录并打印曲线图